线形质粒DNA5粘性末端去磷酸实验——抽提法

质粒

CIAPEDTABUFFER酚-氯仿乙醇TE

水浴锅抽干机

1、质粒DNA和CIAP以及BUFFER 37 ℃水浴30min
 

2、补充CIAP 再37 ℃水浴30min
 

3、加入50 mM EDTA至终浓度5 mM 75 ℃加热10min 失活CIAP
 

4、冷却至室温，酚-氯仿抽提，乙醇沉淀浓缩。
 

5、抽干溶液，加适量TE溶解。