用ETDA 和胰蛋白酶混合消化法传代的过程如下
1. 吸出培养瓶内营养液，注入EDTA（0.02%）和胰蛋白酶（0.25%）混合液（1：1），注入量以能覆盖细胞为度，置37 ℃温箱或室温中作用3 分~5 分钟。
在消化过程中，要在镜下随时监视细胞状态，当见到细胞胞质回缩，胞体趋于变圆，细胞相互间缝隙变大时，便立即终止消化。
细胞上述变化在已连接成片的细胞最为明显；可见细胞由于胞质回缩，而相互分离，遂失去原来紧密接触关系，出现明显可见的缝隙。如消化过度则细胞能完全从瓶壁脱落，这时需要做离心分离以防细胞丢失，增加了麻烦；
2. 吸出消化液，注入适量Hanks液洗一二次；注意注入时要缓慢，不要让液体直接冲刷细胞多的部位，朝向瓶底或瓶角部为好，以避免把细胞从瓶壁上冲下来，然后手持培养瓶轻轻晃动，让Hanks液体在细胞面上来回流动，以洗掉残余的消化液，不要用力过猛，否则能把附着不牢的细胞冲掉，减少细胞数量；
3. 吸出Hanks液，加入适量培养液后，用吸管吸、吹营养液，反复轻轻吹打瓶壁上细胞，使之脱落入培养液中形成细胞悬液。
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