细胞冻存一般逐级降低温度,4度30min-1h,不要超过一个小时;-20度30min,不要超过30min,或者可以不需要,直接放到-70到-80度的冰箱,过夜,这一步是必须的,如果像你那样,估计细胞活力已经降低很多。不过还要看细胞类型,癌细胞应该还好一些,我的人表皮角质化细胞在-20度放了超过一个小时,过几天我特意拿出来检测,细胞又一半多已经失去活力了。
很多时候,我们需要把细胞冷冻起来,以便于长期保存,以备不时之需。而复苏,就是使冷冻的细胞苏醒过来,恢复活力。其实,细胞冻存和复苏的protocol教科书和实验手册上面都有,毛博我不想再重复了。这里,毛......
细胞冻存是细胞培养中的重要环节。大家都知道,冻存技术要点是慢冻,标准的冻存程序为降温速率-1~-2ºC/min;当温度达-25℃以下时,可增至-5ºC~-10ºC/min。之前,常用的传统方法是将冻存......