细胞分裂素的生物鉴定(萝卜子叶增重法)

一、原理

细胞分裂素有促进萝卜子叶增大（鲜重增加）的效应。可先做出细胞分裂素浓度与子叶重量增加的关系曲线，再以待测样品进行对比试验，就可鉴定样品中细胞分裂素的浓度或效价。

二、仪器与用具

培养皿（直径9cm）5套；圆形滤纸5张；搪瓷盘（带盖）1个；镊子1把；手术剪1把。

三、试剂

漂白粉适量；

5mg/L激动素或6-BA溶液。

四、方法

1、种子萌发取均匀一致的萝卜种子200粒，用饱和漂白粉溶液消毒20min并洗净，摆放在垫有滤纸并用蒸馏水湿润过的带盖搪瓷盘中，25℃暗中催芽。约30h后，即萌发而展开一大一小两片子叶。从每个幼苗上切下较小的一片子叶，注意子叶上不能残留下胚轴。选择大小一致的子叶50片供试。

2、子叶培养取直径9CM的培养皿5套编号，并在各培养皿垫一张与皿底大小相同的滤纸，从1号至5号培养皿分别加5.0、0.5、0.05、0.005mg/L的激动素或6-BA水溶液和蒸馏水各3ml。溶液稀释方法同IAA，在各个培养皿的滤纸上放10片子叶，盖好皿盖，并把培养皿放在垫有湿润滤纸的搪瓷盘上，用玻璃板将盘子盖好，以维持高湿度，在荧光灯下25℃培养3天，用分析天平称每个子叶鲜重，求其平均数。

3、以每一处理的子叶平均重为纵坐标，激动素或6-BA浓度的对数为横坐标，绘出两者的关系曲线。用同样方法以未知样品溶液培养萝卜子叶，与标准曲线比较，即能大致确定未知样品细胞分裂素的含量或生物效价。

五、附注

进行未知样品分析时，需经提纯，除去植物材料中的糖分和无机盐等物质，以防样品在培养期间发霉。