发布时间:2021-05-28 20:53 原文链接: 细胞外囊泡的检测方法

外泌体具有磷脂双分子膜结构,导致其沉降系数和蛋白质聚集体有着很大的不同。而且外泌体膜表面存在特异性膜蛋白如CD9和CD81,前者被证实和肿瘤迁移有关,后者与丙型肝炎病毒的侵染有关。而因为外泌体具有这些显著的易分离的特点,我们可以通过密度梯度离心,亲和层析等方法对外泌体进行分离和纯化。

细胞外囊泡的检测方法

目前细胞外囊泡(EVs)的检测方法主要有扫描电子显微镜、原子力显微镜、动态光散射技术、纳米微粒追踪分析术(NTA)、流式细胞仪和ELISA等,由于通量高、用时短、操作简单,ELISA和流式细胞仪是比较常用的方法。ELISA方法容易受其他可溶性抗原的干扰,而且无法知道囊泡的大小、数量等信息;流式细胞仪不仅可以检测囊泡的大小、数量,而且通过细胞特异的标记物染色可以检测囊泡的来源,将囊泡进行分类,因此,流式细胞仪理论上是进行囊泡快速、高通量、多参数检测的较优选择。然而,传统流式细胞仪针对的样本主要是细胞,散射光的检测极限通常是300-500nm,而大多数细胞外囊泡的直径都在300nm以下,由于无法与背景噪音区分,直径小于300nm的细胞外囊泡很难被检测到,因此,囊泡数量往往被低估,检测结果自然也不准确。

齐岳生物提供一系列外泌体分离产品和工具,用于表征和分析其RNA和蛋白质含量,以及体外和体内追踪,以帮助您进一步了解这些迷人的外泌体。外泌体是包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡 (30–150nm),由所有体外和体内细胞持续分泌。由于人体内复杂的功能,包括细胞间通讯和信号转导,外泌体正在改变研究。这些细胞外囊泡正在生长,这既是为了了解其生物学功能,也是为了将其用于实际应用,如无创诊断和高级治疗开发。

产品介绍:

Exosome,中文名外泌体,是一种能被大多数细胞分泌的微小膜泡,具有脂质双层膜结构,直径大约40-120 nm。尽管外泌体在1983年就被发现,但人们一直认为它只是一种细胞的废弃物。然而近几年,人们发现这种微小膜泡中含有细胞特异的蛋白、脂质和核酸,能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能。这些发现点燃了人们对细胞分泌膜泡的兴趣。

研究发现外泌体在很多生理病理上起着重要的作用,如免疫中抗原呈递、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等。不同细胞分泌的外泌体具有不用的组成成分和功能,可作为疾病诊断的生物标志物。外泌体具有脂质双层膜结构,能很好的保护其包被的物质,且能靶向特定细胞或组织,因此又是一种很好靶向给药系统。

外泌体可大致分为3大类:

(a)由质膜分裂产生的微囊泡;

(b)在内质网内形成并在多囊泡体与质膜融合后释放的外体;

(c)凋亡体a作为细胞凋亡过程中的囊泡重新释放。低等生物,如细菌和寄生虫,也能分泌外囊泡。


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