细胞形态结构的观察及大小测定

一、实验目的：

1、观察几种细胞的形态结构及植物细胞的胞间连丝。

2、掌屋用测微尺测定细胞大小的原理和方法。

二、实验原理：

测微尺分物镜测微尺（简称物微尺或台微尺）和目镜测微尺（简称目微尺），两者配合使用，可以测量细胞大小。目微尺是一个可以放在目镜内的特制玻璃圆片，圆片中央刻有一条直线，此线分为若干格。物微尺为一载玻片中央封固的小尺，长1mm，被等分为100格，长为0.01mm(10μm)。当测量细胞大小时，不能用物微尺直接测量细胞，而只能使用目微尺。因目微尺测量的细胞是经物镜放大后的像，而它每格所代表的实际长度随物镜的放大率而变，在测量时需要先用物微尺来标定，求出某一放大率时目微尺每格所代表的实际长度，然后再用以测定细胞大小。

将物微尺放在显微镜的载物台上，小心转动目镜测微尺，移动物微尺使两尺平行，起点线重合，然后找出另一处两尺刻度重合处，记录起点线到重合线之间的各尺的刻度数（格数），按下式计算，在该放大系统下目微尺每格所代表的实际长度：

例如：目微尺是100格，其对应的物微尺是80格，则目微尺每格所代表的实际长度为80/100×10=8μm。

测量某一细胞时，如果目微尺测得其横径为5格，则此细胞横径为8×5=40μm。

三、实验用品：

普通光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、消毒牙签、烧杯、吸管、0.9%生理盐水、0.1%亚甲基兰、蒸馏水、吸水纸。

四、实验材料：

口腔黏膜上皮细胞；洋葱内表皮；西红柿；芹菜；韭菜；红辣椒。

五、方法步骤：

（一）、细胞形态结构的观察：

1、涂片法：人口腔上皮细胞的观察：

1）、在洁净的载玻片中央，滴一滴生理盐水。

2）、用消毒牙签的一端，在漱净的口腔侧壁上轻轻地刮几下。

3）、把牙签上附有碎屑的一端，放在载玻片上的生理盐水滴中涂匀。

4）、用镊子夹起洁净的盖玻片，将它的一边先接触载玻片上的生理盐水滴，然后，轻轻地盖在水滴上。然后在盖片的一侧加一滴0.1%亚甲基兰染液，在盖片的另一侧用吸水纸吸取，染色后细胞核被染成深蓝色，细胞质浅蓝色。

5）、用显微镜观察细胞形状，细胞呈扁平鳞状。

2、西红柿果肉细胞涂片制作似人口腔上皮细胞，但将生理盐水换成蒸馏水，且不必染色就可直接观察。细胞大小和形状如何？

3、撕片法：撕一小片植物表皮（洋葱、芹菜和韭菜），放在盛有一小滴蒸馏水的载玻片上，用镊子展平，盖上盖玻片在显微镜下观察。细胞大小和形状如何？

4、取红辣椒一片，用刀片刮去果肉，将表皮制成临时装片，用显微镜观察表皮细胞，能看见胞间连丝吗？

（二）、细胞大小的测定：

1、将目微尺放于目镜内。

2、将物微尺放在显微镜的载物台上。

3、小心转动目镜测微尺，移动物微尺使两尺平行，起点线重合，然后找出另一处两尺刻度重合处。

4、记录起点线到重合线之间的各尺的刻度数（格数），按下式计算，在该放大系统下目微尺每格所代表的实际长度：

目微尺每格所代表的实际长度 = 物微尺格数/目微尺格数 × 10μM

5、将制作的各种细胞临时装片置于载物台上，测定细胞的大小（包括长径和短径）。

六、注意事项：

1、制作临时装片时避免产生气泡。

2、用物微尺标定的目微尺每格长度的数值代表在某一放大系统下的情况，这一数值会随物镜的放大率而改变，因此，在什么放大倍数物镜下标定的目微尺只能在同一放大倍数的物镜下测定细胞的大小。