二、结果
两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24 小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长，正常兔 7 天左右、而梗阻兔则需10~12 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。均传代顺利，传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。本组中均传至第8 代，经第8 次传代后， 平滑肌细胞仍生长迅速，未见衰老迹象。倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构(图1 中对照组2 周的 细胞；图2 中实验组培养2 周的细胞)。细胞爬片HE染色见膀胱平滑肌细胞细胞核呈两端钝圆的卵圆形平滑肌细胞核型(见图 3)。电镜检查可见平滑肌细胞密班结构(图 4)。免疫组化染色检测α-SMA 呈阳性反应(图 5)。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-SMA 呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑肌细胞的纯度几乎99%。
图1. 对照组2周的细胞
图2. 实验组培养2周的细胞
图 3. 细胞爬HE染色见膀胱平滑肌细胞 ，细胞核呈两端钝圆的卵圆形平滑肌细胞核型
图4. 分离后培养细胞的电镜检查发现，平滑肌细胞致密斑结构
图5. α-SMA免疫组化证实该方法能获得单一膀胱平滑肌细胞(棕色为α-SMA阳性)
