由于支原体污染早期不易被发现,建议实验室定期对细胞上清做适当监控(可使用德国MB公司的Verno ®Gem OneStep试剂盒或Verno ®Gem qOneStep试剂盒,取2ul细胞上清即可判别是否有支原体污染,灵敏度很高,覆盖的支原体物种很广)。
那么,如何区分支原体污染与细菌、真菌、病毒的污染呢?
它们的各自表现如下:
细菌污染
细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显,细胞大多在24小时死亡。
霉菌污染
培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差。
病毒污染
病毒污染不易发现。细胞和培养液无明显变化。病毒在倒置显微镜下也不可见。大多病毒对细胞的生长影响不大,有的外源病毒会造成细胞变异、转化。病毒的污染会干扰目的病毒的感染和产量。
支原体污染
支原体在倒置显微镜下不可见。早期污染,培养液也不浑浊。后期污染会出现培养基变色、细胞生长受抑、细胞成团、镜下有小颗粒甚至死亡。
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