发布时间:2019-09-17 16:04 原文链接: 细胞死亡时的质膜变化实验

  • 磷酯酰丝氨酸外化的检测

  • PI吸收分析

           

实验材料

细胞样品

试剂、试剂盒

结合缓冲液 膜联蛋白 HEPES 缓冲液

仪器、耗材

组织培养板

实验步骤

1. 在 96 孔圆底组织培养板每孔中加入 100 μl 细胞样品,200 g 离心 5 分钟。

2. 吸出上清,在结合缓冲液中用 100 μl 膜联蛋白 V-FfffC 重悬细胞。室温避光培育 5 分钟。加入 100 μl HEPES 缓冲液,将样品转移至 FACS 微管中。



3. 在进行 FACS 分析之前,加入 20 μl PI。用散点图或密度图分析结果,绘出 EL1XFL2。膜联蛋白 V 阳性,PI 阴性细胞即为凋亡。双染细胞或是坏死,或是凋亡晚期。

            展开


相关文章

免疫源性细胞死亡机制研究获进展

近日,中山大学药学院教授邹滔滔课题组与广西师范大学教授梁宏课题组合作,在免疫源性细胞死亡(immunogeniccelldeath,ICD)机制研究获进展。相关研究发表于J.Am.Chem.Soc.。......

Science:湘雅三医院团队发现热射病的重要致病机理

热射病(Heatstroke,又称“重度中暑”)是一种由热应激引起的、危及生命的疾病,与循环衰竭和多器官功能障碍有关。随着全球气候变暖,热射病引起的死亡人数逐年增加,但其致病机制尚不清楚。近日,中南大......

基因簇调控水稻免疫和细胞死亡的分子机制

该研究利用基于代谢物的全基因关联分析在水稻9号染色体上鉴定到控制羟基肉桂酰腐胺代谢物合成的基因簇。该基因簇由一个鸟氨酸脱羧酶基因(OsODC)和两个串联的腐胺羟基肉桂酰转移酶基因(OsPHT3和OsP......

Nature发现触发细胞死亡机制:“左手杀手”

Z型核酸(Z-DNA)是具有不寻常的左手双螺旋结构的双链DNA和RNA分子,与经典的右手Watson-Crick双螺旋相反。这种核酸是40多年前发现的,但迄今为止,我们对其生物学功能的了解仍然很少。德......

Nature:重大进展!揭示酶caspase8可控制细胞和坏死性凋亡

为了保护健康的组织正常运转,细胞利用不同的细胞死亡机制来处理不需要的细胞(比如受到感染的或衰老的细胞)。细胞凋亡(apoptosis)是一种“细胞自杀程序”,并不引起组织损伤,而且是由caspase-......

Nature:RAS突变通过VATPase定位到质膜,以激活大胞饮

RAS突变可以说是最难搞定的致癌突变之一了,发现最早,分布最广,虽说有了靶向药,但也只对携带RAS突变的肺癌有较好的效果。几乎全部携带KRAS突变的胰导管腺癌,也成为了当之无愧的癌中之王。除了自己没法......

Nature|Caspase8决定细胞死亡的不同方式

蛋白酶caspase-8同时具有诱导和抑制细胞死亡的功能:它可以通过死亡受体(Deathreceptor),比如TNFR1来诱导细胞凋亡(Apoptosis)【1】,同时,也可以通过激酶RIPK3和M......

JNeurosci:细胞死亡后,视网膜会自我重组

根据发表于JNeurosci的一项对老鼠的研究,经过基因治疗后,视网膜可以自我重组,恢复正常的光反应。失明通常是由杆状光感受器死亡引起的,杆状光感受器是视网膜中的一种细胞。图片来源:Wangetal.......

PNAS:一种高敏感和高特异性的细胞死亡检测方法

细胞死亡是健康和疾病状态下人类生物学的一个重要特征。它可以预示病理早期阶段(例如形成中的肿瘤或自身免疫疾病/神经退行性疾病的开始),标志疾病进展,反映治疗的成功(如抗癌药物),鉴别治疗意外的毒性作用等......

MolCell:发现胆固醇运输到质膜的关键调控分子

细胞质膜PM(PlasmaMembrane)是隔离细胞内外的主要屏障,能够维持胞内环境的相对稳定,通过细胞传导控制细胞功能,还能通过内吞、胞吐作用选择性地运输物质。细胞膜主要由脂质和蛋白质构成,其中胆......