细胞浸润生长性检测实验

浸润性生长是细胞浸入或穿透其它组织增殖生长能力，浸润生长性检测是检测癌性细胞的一项有意义的指标。检测方法需用其它正常组织和癌细胞共同培养，观察癌细胞向正常组织浸润生长的情况。

鸡胚

Bacto琼脂 Eagle 缓冲液 小牛血清 福尔马林 Hanks液 碘酒

玻璃圈 CO2温箱 培养皿 平皿盖 手术剪 手术钳 离心机 注射器 烧杯

常用鸡胚皮肤或心肌组织块，作为被浸润生长的对象；今以鸡胚皮肤为例，培养过程如下

1.  程序

（1）鸡胚浸出液制备
 

（2）琼脂层制备
 

1 %Bacto琼脂（用不含NaHCO3的Eagle缓冲液配）10 分
 

小牛血清 4 分
 

鸡胚浸出液 4 分

（3）鸡胚皮培养

无菌从10 天胚龄鸡胚背部取皮，切成6～8mm³小块；每皿中置2～3 块，贴在琼脂层表面；

（4）取内径6 mm，厚2 mm的无菌小磁杯或玻璃圈（硅橡胶圈亦可），套在鸡皮小块上；

（5）共培养

向每个小磁圈中加入25～30 ul 细胞悬液（含10⁴个细胞的2 倍培养液），盖上平皿盖，置37 ℃CO₂温箱中培养；

（6）补液

次日再向每个环中补加2 倍培养液2.5 ul；

（7）切片观察

第4 天挖取出鸡皮块，10%福尔马林固定，常规包埋、切片、染色、光学显微镜下观察细胞对鸡胚皮肤浸润的情况。

2.  结果

如癌性细胞已浸入鸡胚皮肤内，说明该细胞具有浸润生长能力。

实验过程应避免细菌感染，如癌性细胞已浸入鸡胚皮肤内，说明该细胞具有浸润生长能力。

鸡胚浸出液内含有生长因子、大分子核蛋白和小分子氨基酸等，有刺激细胞生长作用，为早年培养使用的培养用液，现已被合成培养液所代替，但在某些研究中仍有一定应用价值。

来源《组织培养和分子细胞学技术》