细胞生物学实验技术

细胞生物学实验技术

METHODS AND TECHNIQUES

第一节显微技术

光学显微镜：以可见光（或紫外线）为光源。

电子显微镜：以电子束为光源。

一、光学显微镜

（一）普通光学显微镜

1、构成：

①照明系统

②光学放大系统

③机械装置

2、原理：经物镜形成倒立实像，经目镜进一步放大成像。

3、分辨力：指分辨物体最小间隔的能力。

R=0.61λ/N．A．

其中λ为入射光线波长；N．A．为镜口率＝ｎsinα/2，n=介质折射率；α=镜口角（样品对物镜镜口的张角） 。

思考：如何提高显微镜的分辨能力？

表一、几种介质的折射率

介质 空气 水 香柏油 α溴萘

折射率 1 1.33 1.515 1.66

显微镜的几个光学特点：

制作光学镜头所用的玻璃折射率为1.65~1.78，所用介质的折射率越接近玻璃的越好。

sin α /2的最大值必然小于1；介质为空气，镜口率一般为0.05~0.95；油镜头用香柏油为介质，镜口率可接近1.5。

普通光线的波长为400~700nm，分辨力数值不会小于0.2μm，人眼的分辨力为0.2mm,因此显微镜的最大设计倍数为1000X。