细胞组分的化学反应实验

实验方法原理 细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后，其中的DNA和RNA出现不同的呈色反应，一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力，且这两种染料的作用有选择性，甲基绿染高聚分子的DNA呈蓝绿色，呱咯宁染低聚分子的RNA呈红色。由此对细胞中的DNA和RNA进行定位、定性、和定量分析。

实验材料 小白鼠

试剂、试剂盒 PBS缓冲液丙酮二甲苯乙醇三氯醋酸固绿硫酸铜联苯胺混合液番红过碘酸酒精液Schiff氏酒精液亚硫酸水苏木精Carnoy固定液

仪器、耗材 光学显微镜解剖器材蜡盘载玻片吸水纸染色缸盖玻片水浴箱

实验步骤

一、方法

1.  接种Hela细胞于盖片上并培养24~48小时，使长成单层。

2.  取出盖片，用PBS（pH7.2）轻轻冲洗盖片表面去除残渣。

3.  放入Carnoy固定液中固定l小时。

4.  浸入甲基绿-呱咯宁醋酸缓冲液中30分钟染色。

5.  取出盖片放入蒸馏水中轻轻漂洗2~3次（2~3秒钟左右），吸去水分。放入纯丙酮中分色2~3秒钟。

6.  放入1/2丙酮+1/2二甲苯中5秒钟。

7.  放入纯二甲苯中透明5分钟。

8.  滴一滴中性树胶于载玻片上，将盖片标本面朝下封片。

9.  镜下观察

二、结果

细胞质被染成浅红色，细胞核被染成蓝绿色，而其中核仁被染成紫红色。