细菌内毒素检测

实验方法原理

鲎是一种海洋节肢动物，血液中含有一种变形细胞，此细胞的裂解物可与微量细菌内毒素起凝胶反应，即细胞裂解物中的一种酶被内毒素激活，使细胞裂解物中蛋白质形成凝胶。鲎试验具有快速、简便、灵敏等优点。

实验材料 鲎试剂

试剂、试剂盒 生理盐水无菌水内毒素

仪器、耗材 安瓶习惯水浴箱

实验步骤

一、材料

1.   鲎试剂(即装于安瓶内的鲎变形细胞裂解物的冻干制品)。

2.  待测物(血液、细菌培养上清液或注射剂等)。

3．标准内毒素(大肠杆菌内毒素含量100 ng/ml)、无热原生理盐水、无菌蒸馏水。

4．1 ml无菌吸管、37℃水浴箱等。

二、方法

1.   打开3支鲎试剂安瓶，各加0.1 ml无菌蒸馏水使之溶解，同时编号①、②、③。

2.  向①、②、③安瓶中分别加待测物、标准内毒素、无热原生理盐水各0.1 ml。

3.  轻轻摇匀后，垂直放37℃水浴，15～30 min后取出观察有无凝固。

三、结果观察

十十 形成牢固凝胶，倒持安瓶凝胶不动。

十 形成凝胶，但不牢固，倒持安瓶凝胶能动。

- 不形成凝胶。

凡结果阳性者表示内毒素阳性，本实验②为阳性对照，③为阴性对照。