细菌的生化反应检测

不同细菌  由于所含的酶系统不完全相同，因而对营养物质的分解能力及代谢产物亦不一致，据此，可用以鉴别细菌的种类。

一、单糖发酵试验

【原理】

单糖发酵是将葡萄糖，乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内，使其最终浓度为0.75~1％。并加入一定量酚红指示剂及小倒管，制成单糖发酵管，接种细菌经37℃培养18~24小时，若能分解糖产酸则酚红指示剂由红变黄，若能分解甲酸有CO2和H2等气体形成，小倒管内则聚集有气泡；不分解，则指示剂不变色。

【材料】

1．菌种：大肠杆菌，伤寒杆菌18~24小时琼脂  斜面培养物。

2．培养基：葡萄糖发酵管，乳糖发酵管等。

【方法】

1．将伤寒杆菌，大肠杆菌  按照液体接种方法分别接种于葡萄糖及乳糖发酵管内。

2．置37℃孵箱培养18~24小时。

3．观察结果：由于一些细菌能分解某种糖类产酸，所以培养基中PH下降到7.0以下，在酚红指示剂的显示下，培养基颜色由红变黄。产酸者以“+”表示，如果同时产生气体，则培养基中小倒管内有气泡出现，此乃产酸又产气，以“⊕”表示，不分解，则指示剂不变色，用“-”表示。

【结果】

伤寒杆菌大肠杆菌

葡萄糖+⊕

乳 糖-⊕

二、V-P(Voges-Proskauer)试验

【原理】

有些细菌如产气杆菌，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸脱羧，生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中被氧化为二乙酰，再与培养基内胍基结合，生成红色化合物，V—P试验阳性。

【材料】

1．菌种：大肠杆菌，产气杆菌18~24小时琼脂斜面培养物。

2．培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基。

3．试剂：V-P试剂