1. 取体重25 g左右健康小白鼠两只，分第标记1，2号。
2. 取1号小白鼠，用右手轻拖鼠尾，使其爬行粗糙物面上，再用左手拇，食两指抓紧小白鼠颈项及其两耳，左手掌握住鼠体，小指按住鼠尾以75%酒精棉球消毒腹部皮肤，腹腔应注射破伤风抗毒素0.2 ml（1500 单位/毫升），经30 min后，于小鼠右后腿肌肉注射破伤风外毒素（1：100稀释）0.2毫升。
3. 取2号小白鼠，在右后腿肌肉内注射破伤风外毒素（l：100稀稀）0.2毫升。
4. 将以上两只小白鼠分笼喂养，逐日观察有无发病，发病者常表现为肌肉痉挛，患腿僵硬。病变由局部蔓延至全身。于2～3日内死亡。
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