结合在镍柱上的蛋白可以放过夜第二天洗脱吗

一般情况下是不可以的，蛋白在柱上结合时间过长可能会影响其结构的稳定性。
如果本身就是结构比较稳定的蛋白质，结合上镍柱后4度放置过夜第二天洗脱问题应该也不大，但是有可能洗脱收率会降低。