这一步仅为基因表达的系列分析 cDNA 合成中实验方案 A 的一部分,在实验方案 B 中,cDNA 已经结合到链霉抗生物素包被的 PCR 试管上,因此不必用磁珠结合。
实验材料 | 磁珠 |
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试剂、试剂盒 | Dynabead M-280链霉抗生物素 |
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仪器、耗材 | 磁设备 |
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实验步骤 | 实验方案 A振荡 lmin 以使 Dynabead M-280 链霉抗生物素重新成为混悬液。 将 2X 的 100 ul Dynabeads 转移至 U—个 1.5 ml 的 Eppendorf 试管中。 用磁设备固定磁珠,移去上清液。 用 200 ul 的 IX 结合及冲洗缓冲液重悬磁珠冲洗 3 次,固定磁珠,移去冲洗液。 将 NlaIII 酶消化后的 cDNA 分成两份各 10ul,每份中加入 90ul 的重蒸水和 100ul 的 2X 结合及冲洗缓冲液;混合后加入一份冲洗过的磁珠。 混合后,在室温下 W 育 30 min(每 IOmin 混合 1 次)。 用磁设备固定磁珠,弃去上清液。 用 200ul 的 IX 结合及冲洗缓冲液冲洗固定的磁珠 3 次,然后再用 200ul 的 LoTE 冲洗 1 次。 在冲洗完最后 1 次后,固定磁珠并移去 LoTE。 继续进行第 5 步
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