结缔组织染色实验——网状纤维与胶原纤维染色

网状纤维是网状结缔组织中的一种纤维，由交错排列的纤细的纤维组成。由于网状纤维由含有糖蛋白的胶原蛋白组成，这种组织蛋白质易与氨性银结合，再选用酸性染料染色液，能够显示网状纤维与胶原纤维的二种组织结构成分。常用 Gomori 银与丽春红-苦味酸复合染色法。

石蜡组织切片

二甲苯乙醇蒸馏水草酸硫酸铁铵高锰酸钾硫酸硝酸银氢氧化钠丽春红 S 水溶液苦味酸饱和液中性树胶

氨性银溶液

甲液：硝酸银 10.2 g，蒸馏水 100 ml。

乙液：氢氧化钠 3.1 g，蒸馏水 100 ml。

取甲液 5 ml，滴加氨水至溶解清亮为止。再加入 5 ml 乙液，此时溶液突然变为黑色，再滴加氨水至清亮为止。补加 4 滴氨水，用蒸馏水补足 50 ml。

高锰酸钾氧化液：高锰酸钾 0.5 g，蒸馏水 95 ml，3％ 硫酸 5 ml。

草酸漂白液：草酸 2 g，蒸馏水 98 ml。

硫酸铁铵液：硫酸铁铵 2 g，蒸馏水 98 ml。

1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。

2. 高锰酸钾氧化液处理 5 min，自来水洗 1 min。

3. 草酸漂白液浸泡 2 min，自来水 1 min。

4. 硫酸铁铵液处理 2 min，自来水洗 2 次。

5. 蒸馏水洗 2 次，氨性银溶液处理 1 min。

6. 蒸馏水洗 2 次，20％ 甲醛液还原 3 min。

7. 蒸馏水洗 2 次，0.2％ 氯化金处理 1 min。

8. 蒸馏水洗 2 次，丽春红-苦味酸染色液处理 3 min。

9. 无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

1. 配制氨性银溶液必须使用干净器皿，放在冰箱内保存，可用较长时间。

2. 高锰酸钾氧化液存放时间不能过长，以免失去氧化效果。

3. 氨性银染色后，不能将银液倾去，要将蒸馏水直接倒在组织切片上轻洗。

结果：网状纤维呈黑色，胶原纤维呈红色，背景呈黄色。