维生素的液相色谱分离分析检测

维生素是人体内代谢过程中起重要作用的物质，人体所需维生素量很少，但却是构成生命活动不可缺少的营养物质，除少数维生素可在人体内合成外，大多数维生素都必需由食物中摄取。

维生素种类很多，在化学结构上并无共性，它们可为胶类（Vb1），醛类（Vb6）或醇类（Va）。根据其物理性质可分为水溶性维生素（如Vc，Vb1、Vr2）和油溶性维生素（如Va，Vd，Ve）两大类。

用反相离子对色谱分离水溶性维生素如图6-4-44所示。色谱柱为Biophase ODS（5μm，φ4.6mm*250mm），流动相：（A）1% 乙酸 + 0.5%三乙胺溶液（pH=4.5）；（B）A + 甲醇（50:50）。梯度洗脱程序在0-10min 内，流动相 B 由 0 增至，再维持15min。流量为1mL/min，用UVD（275nm）检测。样品溶于流动相 A 中进样。三乙胺的浓度对Vb1、Vb6、烟酸和Vk3的分离影响很大；Vk3样品中应加入Na2SO3以避免2- 甲基萘醌的生成；Vr12和烟酸在一起时不稳定应在测定时现配现用。

水溶性维生素也可在反相键合相柱（C8）或胺基键合相柱（μ- Bonddapak - NH2）实现分离。

油溶性维生素可用反相键合相柱分离，见图6-4-45。色谱柱为Permaphase OSE（30μm（薄壳型），φ2.1mm*1000mm），流动相 A 为H2O；B 为CH3OH。梯度洗脱程序是 B 以5%/min的梯度增加；流量为2mL/min；柱温 70℃；用UVD（254nm）检测。

维生素 E（生育酚）的α、β、γ、δ异构体可用反相键合相柱进行分离，见图6-4-46。色谱柱为Lichrospher WP200 - C30(3μm，孔径20mn，φ4.6mm*250mm）；流动相为甲醇；流量分别为（a）1mL/min 和（b）0.3mL/min。用UVD（295nm）检测。