当我们经过初次筛选和二次筛选后得到的那对引物便可以用于合成,合成后我们经过 PCR扩增可以对引物进行最终的评估。
一是PCR扩增的特异性和效率。经过PCR条件优化后能否获得特异性条带,即无目的条带之外的多余条带。另外,PCR产物的量是否足够,即无不出带和条带很弱的现象。
二是以DNA为模板设计引物时,PCR扩增产物是否与预期PCR产物大小相当。如果相差太大G 于100 b ,有可能是错配产物。
三是是否形成引物二聚体带。
