1、PCR扩增体系问题。用其他正在进行的且扩增正常的模板和引物证明PCR扩增体系没有问题,即PCR反应混合物、水、取液器、PCR仪、操作等都是好的(阳性对照)
2、引物问题。用以前扩增产物做模板(稀释50倍),证明引物没有问题
3、只是模板问题了。因为样本降解的可能性比引物降解的可能性高得多。也可能是样本中的抑制物过多(新鲜时没有溶出来)。
