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肌强直性肌营养不良的三核苷酸重复的分析实验

发布时间:2019-04-11 15:42 原文链接: 肌强直性肌营养不良的三核苷酸重复的分析实验

患者gDNA三核苷酸重复的杂交分析

实验方法原理gDNA杂交分析对于确定DM>250bp 的扩增特别有效。此法可用于排除 E3 至 E4 类扩增(表 9.4.1),后者通过 CTG-PCR 只有一条等位基因可见,并且 CTG-PCR 产物与(CTG)10 杂交不能检测到原突变或扩增(基本方案 1)。
实验材料

纯化的gDNA

试剂、试剂盒

EcoR I 限制性内切核酸酶10 X 限制性内切核酸酶缓冲液琼脂糖胶1 X TBE 缓冲液10 X 凝胶载样缓冲液分子质量标记物溴化乙锭NaOH中性化溶液预杂交 杂交缓冲液洗脱缓冲液

仪器、耗材

铸造托盘厚梳齿带正电尼龙膜滤纸

实验步骤


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