肝脏或肌肉中爱普菌素、阿维菌素、多拉菌素和伊维菌素残留量的测定
实验材料 牛肝脏牛肌肉
试剂、试剂盒 乙腈正己烷氮气三乙胺
仪器、耗材 离心C8SPE柱针筒滤膜色谱柱
实验步骤
1. 提取与净化
称取匀浆的牛肝脏或肌肉2.5 g，置于50 mL离心管中，加入8 mL乙腈，润动0.5 min， 2500 r/min离心5 min，取上清液。残留组织用8 mL乙腈重复提取一次，合并两次的上清液于500 mL的离心管中，加30 mL纯水-三乙 胺（30 + 0.045），过C8SPE柱（500 mg，3 mL），用 20 mL乙腈-水-三乙胺（40 + 60 + 0.1）淋洗，吹干；再用3 mL正己烷淋洗，吹干；用2 mL乙腈洗脱，收集。取4 mL纯水和6uL三乙胺加至乙腈洗脱液中。过C8SPE柱（500 mg，10 mL），用10 mL乙腈-水-三乙胺（30 + 70 + 0.1）淋洗，吹干，再用8 mL正己烷淋洗，吹干； 最后用2 mL乙腈洗脱，吹干，收集洗脱液于5 mL刻度试管内，50 ℃氮气吹干，用0.5 mL乙腈定容，过0.45 um针筒滤膜，进HPLC-MS/MS分析。
2. 液谱-质谱串联条件
色谱仪：Waters 2690；
流动相：乙腈-水-甲酸（95 + 5 + 0.1）；
流速：0.2 mL/min；
色谱柱：C18 柱，150 mm，2.1 mm，3 um；柱温：（20 ± 2）℃；
进样量：1O0L；
质谱仪：电喷雾源（ESI）；
毛细管电压：3.2 kV；
锥孔电压：70 V；
源温：120 ℃ ；
雾化气：300 ℃ ；
倍增电压：650 V；
碰撞气：氩气