许多疾病可导致胆红素和尿胆原结果的异常,如肝炎、肝硬化、肝癌、胆道疾病等。但胆红素、尿胆原易分解且胆红素对尿胆原检测有一定的干扰。笔者比较了手工法与法对各种肝胆疾病尿胆红素(BIL)和尿胆原(UBG)检测结果,探讨尿液胆红素对尿胆原测定的影响。
1 材料与方法
1.1 标本采集 采用本院住院患者尿标本,其中原发性肝癌80例,阻塞性黄疸44例,肝占位30例,胆管癌11例,胆结石37例,胆囊炎32例,其他48例。
1.2 与试剂 广州花都高尔宝GEB―200型半自动尿液化学分析仪及其GEB11试纸条。手工法测定试剂尿胆红素采用改良哈氏浓缩试剂,尿胆原采用欧氏试剂。
1.3 方法
1.3.1 手工法 [1] (1)尿胆红素检测:取尿液约5ml,加入100g/L氯化钡溶液2.5ml并混匀,以TDL―60B离心3~4min,轻轻将上清液弃去,加氧化剂2~3滴放置片刻观察结果。(2)尿胆原检测:如尿中含有胆红素,应取尿液5份,加入100g/L氯化钡1份混匀,离心沉淀除去胆红素,取上清液1ml加尿胆原试剂0.1ml,静置10min观察结果。1.3.2 仪器法 按照尿十项分析仪检测要求检测。
2 结果
2.1 手工法和仪器法检测结果比较 尿液分析仪检测150例尿胆红素和尿胆原均为阳性的标本与32例尿胆红素为阴性而尿胆原为阳性的标本经手工方法检测对照结果,见表1。
表1 尿液分析仪与手工检测对照结果比较 (略)两组假阳性检出率差异有非常显著性,说明尿胆红素可能使尿十项检测尿胆原结果出现假阳性。
2.2 尿胆红素含量与尿胆原假阳性关系 为了进一步分析尿胆红素含量对尿胆原结果的影响,对尿胆红素含量按照仪器检测结果进行半定量分级并与手工结果对照,见表2。结果发现当尿十项检测尿胆红素结果在(++)以上时出现尿胆原假阳性的结果显著增加(P<0.01)。
表2 尿胆红素含量与尿胆原假阳性关系 (略)
2.3 手工检查尿胆原假阳性结果 为排除仪器系统误差及其他因素对检测的影响,笔者对100例尿十项检测尿胆红素及尿胆原均为阴性的正常尿液标本进行手工方法检测对照发现19例尿胆原为假阴性。
3 讨论
尿胆原本身性质不稳定,易于氧化成尿胆素不能与试剂发生反应,故尿液不新鲜时会出现假阴性 [2] 。当尿液中含有甲醛防腐剂或亚硝酸盐>0.05g/L,也可以降低反应灵敏度,所以一般情况下易出现假阴性结果 [3] 。笔者检验结果符合此规律。其他条件不变,当尿液中存在胆红素时发现尿胆原假阳性率明显升高,一方面不符合尿胆原易出现假阴性的规律,而且其假阳性例数显著高于对照组。说明尿胆红素可能是导致尿胆原假阳性的主要原因。在尿十项试纸条上,尿胆红素与尿胆原试剂为不同的重氮盐,前者与胆红素交联呈现粉红色,而后者与尿胆原迅速反应形成红色的偶氮染料,两者可能存在一定程度的交叉反应。另一方面可能由于未吸净试剂条上的多余尿液,生成的有色产物渗入临近的尿胆原试剂片上。以上两方面可能是造成假阳性的因素。在实际工作中,应注意吸净多余的尿液,对仪器检测的尿胆素及尿胆原结果均为阳性,且尿胆红素在(++)以上的标本应通过手工对照来进一步确定检验结果。
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