胡萝卜愈伤组织继代培养标准操作程序

实验概要

对胡萝卜进行愈伤组织继代培养操作

实验材料

胡萝卜愈伤组织
固体继代培养基

实验步骤

配制胡萝卜愈伤组织继代培养基 MS盐 1.0mg/L 2,4-D 0.5mg/L KT 30g/L蔗糖 0.1g/L肌醇 13g/L  pH 5.8

1. 1升、放入大三角瓶中高压灭菌。

2. 高压灭菌平皿30个。

3. 超净工作台上，在培养基未凝固前倒入平皿中。每个平皿约30ml。

4. 待凝固后，保鲜膜封口。

5. 黑暗放置1天后使用。

6. 取继代生长20天左右的愈伤进行继代培养，使用镊子夹取3mm大小的颗粒，放入到新鲜配制的培养基上表面，使愈伤组织轻轻接触培养基。每个平皿接种16块左右。

7. 保鲜膜封口。

8. 正面黑暗静止放置。28℃培养。

 

注意事项

1. 注意无菌操作。
2. 镊子每夹取一个平皿，就使用火焰枪进行灭菌。