胡萝卜愈伤组织诱导标准操作程序

实验概要

诱导胡萝卜愈伤组织

实验材料

胡萝卜直根

实验步骤

1. 用清水洗净胡萝卜直根，用小刀削去表皮和顶部。

2. 将其在75%的酒精中消毒5min.

3. 50%的次氯酸钠消毒30min，120rpm。

4. 无菌水漂洗5遍,再用无菌水浸泡30min.

5. 最后用无菌水漂洗3遍..

6. 消毒好的胡萝卜直根,切去表面消毒的1/3部分，下边的2/3部分,留下部分用消毒好的小刀,沿截面横切成厚度1mm左右的小圆片。

7. 然后将小圆片的韧皮部和木质部切去,留下形成层,再切成长3mm,宽1.5mm,高1mm的小长块,接种在诱导培养基MS 2,4-D 1mg/L KT 0.5 mg/L 蔗糖30g/L 13g/L琼脂 pH5.8。28℃，黑暗静置培养。

8. 获得愈伤后进行继代培养，培养环境条件同上相同。