胶体金免疫层析(GICA)技术是20世纪90年代初在免疫渗滤技术基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术,由Beggs等最先用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定。GICA是以NC膜为载体,利用微孔膜的毛细管作用,使滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移,如同层析一般。
免疫金复合物干片粘连在近NC膜条下端(c),膜条测试区(t)包有特异抗体,当试纸条下端进入液体标本样中,下端吸水材料吸取液体向上端移动,流经c处时,使干片上的免疫金复合物复溶,并带动其向膜条渗移,若标本有特异性抗原时,可与免疫金复合物的抗体结合,形成的金标抗原—抗体复合物流至测试区,被固相抗体所捕获,形成抗体—抗原—金标抗体复合物,在膜上t处出现红色控制线。
GICA技术操作方便,不需要任何仪器,只需将GICA检测条插入待测样本即可,而且样本基本不需做前处理(可以是组织液、血清和尿液等);检测试纸条体积小;检测结果易于判定,GICA检测条的阴性、阳性反应带呈色很明显,肉眼很容易判断;而且灵敏度高可达到lng;特异性好,因为该检测条大多用单克隆抗体标记,这决定了它具有很好的特异性;速度快,一般只要5—10min。
GICA的这些特性使它在工作量大、设施较简单的动物检验检疫实际工作中具有很大的实用性。GICA技术在动物检验检疫工作中广泛用于诸如猪瘟、蓝耳病、细小病毒病等传染病病原微生物的抗原、抗体检测,也可用于一些违禁和超量使用激素(如性激素)残留的检测。此外,该技术还可用于其他一些微量物质的检测,如抗生素残留检测等。
胶体金免疫层析(GICA)作为一种可靠的免疫学检测技术,其特异性强、灵敏度高、简便快速、无需特殊仪器设备,在动物检验检疫实际工作中有广泛的应用价值。目前国内已有少量兽医用商品GICA检测条生产(如瘦肉精检测条、鸡法氏囊、猪旋毛虫和新城疫检测条等)。如果加大研究开发力度,可望将GICA技术广泛用于各种疾病的快速诊断和检测,为实现我国动物检验检疫工作的科学化、标准化和快捷化具有重要意义。
综上所述,免疫检测虽然是一种比较古老的检测方式,但与新的技术结合后,无论是灵敏度抑或是特异性都有了极大的提高,依旧是动物检验检疫领域中广泛使用的检测手段之一。当然在实际工作中需要依靠多种检测手段和多方面的证据,单一的免疫学检测手段有时无法提供病原学检验所需的足够信息。只有将各种生物技术结合起来,才能帮助我们及时准确地对病原体进行检验、检疫,这对于及时发现和控制病原可能带来的传播和流行具有重要意义。
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