腺苷的鉴别检查方法

鉴别

(1)取本品约10mg,加盐酸溶液(1→2)5ml溶解,加间苯三酚10mg,混匀,在水浴中加热5分钟,即显玫瑰红色(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集886图)一致。

检查

酸碱度取本品0.25g,加水25m1,50℃水浴加热溶解后,放冷,依法检查(通则0631),pH值应为5.57.5。溶液的澄清度与颜色取本品,加水适量,50℃水浴溶解后,放冷,用水制成每1m中含3mg的溶液,依法检查(通则0901第一法与通则0902第一法),溶液应澄清无色有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液1ml,用水定量稀释制成每1ml中约含1g的溶液。杂质对照品溶液取腺嘌呤对照品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含1.0μg的溶液。系统适用性溶液取腺苷和腺嘌呤对照品各适量,置同量瓶中,加水溶解并稀释制成每1ml中含腺苷和腺嘌呤各约0.2mg的溶液灵敏度溶液取对照溶液1ml,置10ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(用2mol/L的氢氧化钾溶液调节H值至5.7)-甲醇(85:15)为流动相;检测波长为260nm;进样体积20l系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,理论板数按腺苷峰计算不低于2000,腺苷峰与腺嘌呤峰之间的分离度应符合要求。灵敏度溶液色谱图中,主成分色谱峰峰高的信噪比应不小于20。测定法精密量取供试品溶液、对照溶液与杂质对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至供试品溶液主成分峰保留时间的2倍限度供试品溶液色谱图中如有与腺嘌呤杂质对照品溶液主峰保留时间一致的色谱峰,按外标法以峰面积计算,腺嘌呤含量不得过0.1%;其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积(0.1%),其他杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3倍(0.3%),小于灵敏度溶液主峰面积的峰(0.01%)忽略不计。残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861第一法)测定供试品溶液取本品约0.2g,精密称定,置10ml顶空瓶中,精密加水5ml,密封。对照品溶液取无水乙醇适量,精密称定,加水定量稀释制成1ml中含0.2mg的溶液,精密量取5ml,置10ml顶空瓶中,密封。色谱条件以100%聚乙二醇为固定液(或极性相近)的毛细管柱为色谱柱;柱温60℃;进样口温度为220℃;测器温度220℃;顶空瓶平衡温度为90℃,平衡时间为分钟测定法取供试品溶液与对照品溶液分别顶空进样,记录色谱图。限度按外标法以峰面积计算,乙醇的残留量应符合规定。氯化物取本品1.0g,依法检查(通则0801),与标准氯化钠溶液7.0m制成的对照液比较,不得更浓(0.007%)。硫酸盐取本品1.0g,依法检查(通则0802),与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较,不得更浓(0.02%)。铵盐取本品5.0g,依法检查(通则0808),与标准氯化铵溶液2.0ml制成的对照液比较,不得更深(0.0004%)。干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过0.5%(通则0831)。炽灼残渣取本品1.0g,精密称定,缓缓炽灼至完全炭化,放冷,加硫酸1.5~2.0ml,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.1%。重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之十。