自动生化分析仪原理与相关技术分析

一、引言

生化分析仪（Chemistry Analyzer）是临床检验中经常使用的重要分析仪器之一它通过对血液或者其他体液的分析来测定各种生化指标：如转氨酶、血红蛋白、白蛋白、总蛋白、胆固醇、肌肝、葡萄糖、无机磷、淀粉酶、钙等。结合其他临床资料，进行综合分析，可以帮助诊断疾病，对器官功能做出评价，鉴别并发因子，以及决定今后治疗的基准等。

所谓全自动生化分析仪，就是把分析过程中的取样、加试剂、混匀、保温反应、检测、结果计算和显示以及清洗等步骤进行自动化的仪器，它可完全模仿并代替手工操作，因此，可以认为目前市场上需要手动更换比色杯（或比色盘） 的分析仪不是真正的“全自动”分析仪。全自动生化分析仪灵敏、准确、快速，不仅提高了工作效率，而且减少了主观误差，提高了检验质量。

全自动生化分析仪涉及光学、精密机械、自动控制、电子电路、热工学、生物化学、分析化学等学科，且要求高精度、高可靠性，是一个十分复杂的系统，国际上仅有少数几个知名跨国公司可以制造，如：贝克曼-库尔特（Beckman-Coulter） 、奥林巴斯（Olympus）、日立（Hitachi）等。在国内，深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司是最早开始研制全自动生化分析仪的企业之一。

二、分析原理

全自动生化分析仪属于光学式分析仪器，它基于物质对光的选择性吸收，即分光光度法。单色器将光源发出的复色光分成单色光，特定波长的单色光通过盛有样品溶液的比色池，光电转换器将透射光转换为电信号后送入信号处理系统进行分析。

分光光度法是基于不同分子结构的物质对电磁辐射的选择性吸收而建立起来的方法，属于分子吸收光谱分析。当光通过溶液时，被测物质分子吸收某一波长的单色光，被吸收的光强度与光通过的距离成正比。虽然现在了解到Bouguer早在1729年已提出上述关系的数学表达式，但通常认为Lambert 于1760年最早发现表达式，其数学形式为：

T=I/I 0 =e -kb

其中I 0为入射光强，I为透射光强，e为自然对数的底， k为常数， b为光程长度（通常以cm 表示） 。

比尔定律等同于Bouguer 定律，只是比尔定律以浓度来表达。将两个定律结合起来，组成Beer-Bouguer定律：

T=I/I 0 =e -kbc

其中c为吸光物质的浓度（通常以g/L 或mg/L 为单位）。将上式取以10为底的对数后，得到线性表达式：

A=-logT=-log(I/I 0 )=log(I 0 /I)=εbc

其中A 为吸光度，ε是摩尔吸收光系数或消光系数。

上述表达式通常称为比尔定律。它表明，当特定波长的单色光通过溶液时，样品的吸光度与溶液中吸收物浓度和光通过的距离成正比。

在波长、溶液和温度确定的情况下，摩尔消光系数是由给定物质的特性决定的。实际上，测得的摩尔消光系数也和使用的仪器有关。因此，在定量分析中，通常并不用已知物质的摩尔消光系数，而是用一个或多个已知浓度的待测物质作一条校准或工作曲线。

由于电子跃迁在基态和激发态之间能量差别较大，因此，室温下几乎所有分子的电子都处于基态。吸收光及返回基态的速度非常快，平衡迅速实现，这使得光吸收的定量准确性相当高。根据工作波段的不同，分光光度法可分为真空-紫外、可见光、紫外-可见和紫外-可见-近红外，其工作波段分别为0.1nm~200nm 、350nm~700nm 、185nm~900nm和185nm~2500nm 。

作为临床生化分析使用，一般要求工作波长为340nm~800nm，属于紫外-可见分光光度法。吸光度与浓度之间简单的线性关系及紫外-可见光相对容易测量，使得紫外-可见分光光度法成为上千种定量分析方法的基础。

三、相关技术分析

全自动生化分析仪可以说是在传统的分光光度计的基础上发展来的。从结构上来说，它包含分光光度计的主要组成部分，如 : 光源、单色器（色散装置）、比色池、检测器等；另外，它还包括生化分析所需的特有部分，如：加样系统、清洗系统、温控系统、软件系统等。

1、光源

理想的光源应在整个波长范围内产生恒定的光强度，噪声低，长期稳定。遗憾的是实际上没有这样的光源，因此，需要依工作波段的不同选取不同的光源。

氘灯可在紫外区产生一定强度的连续光谱，在可见区也能提供有用的光强。尽管现在的氘灯噪声已很低，但灯的噪声仍是限制整个仪器噪声水平的主要因素。

卤钨灯在部分紫外区和整个可见光范围内可产生较强的连续光谱，噪声低，漂移小。大多数全自动生化分析仪采用卤钨灯作为光源。