色谱的分离度是怎么回事

又称分辨率,为了判断分离物质对色谱柱在色谱柱中的分离情况,常用分离度作为柱的总分离效能指标.用R表示.R等于相邻色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比.
　　resolution,R
　　相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值.也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度.R越大,表明相邻两组分分离越好.一般说当R＜1时,两峰有部分重叠；当R=1.0时,分离度可达98%；当R=1.5时,分离度可达99.7%.通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志.当R＝1时,称为4σ分离,两峰基本分离,裸露峰面积为95.4%,内侧峰基重叠约2%.R＝1.5时,称为6σ分离,裸露峰面积为99.7%.R≥1.5称为完全分离.《中国药典》规定R应大于1.5.
　　分离度计算公式：R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)
影响它的因素主要有以下几个：
1、柱子的长短与填料的粒径.柱子越长所装填料也越多,表面积也越大,吸附力也越大,所以分离能力也就高.同样同等长度的柱子粒径越细的,表面积也就越大,分离也就越好.
2、流动相（考虑反相条件下）：
a：水相与有机相比例的大小,有机相高洗脱力强,组份在流动员相中分配的多,填料对其吸附能力弱,因此分离能力也就低.
b、不同溶剂的选择：拿甲醇和乙腈来说,它们俩的分离选择能力就不同.乙腈是非质子性,甲醇是质子性.所以当（甲醇）乙腈分离不好是,可以考虑一下乙腈（甲醇）.
3、温度：温度高传质阻力会低,同样柱压力也会低,因此会使保留时间缩短,对分离有一定影响（只要温度不是偏离室温很大,对分离的影响不是很大）
4、流动的PH值.在分离一些酸、碱物质的时候,PH对分离的影响是很大的,有的会影响到出峰的顺序.因为在不同的PH下它们的解离状态会不同,因此会造就填料对它们的吸附能力改变.
5、离子对的添加（分离酸、碱化合物时）,烷基铵盐类在PH=7.5时与强酸和弱酸形成离子对具有缓冲抑制弱碱作用.烷基磺酸盐在PH=3.5条件下与强碱和弱碱形成离子对,并缓冲抑制弱酸离子.