色谱那些事（第三期）：氨基柱的使用

　　“色谱那些事 ” 回顾：硅胶基质和聚合物基质色谱柱的保存，色谱柱对液相系统的要求

本期内容：氨基柱的使用

　　氨基柱简介

　　氨基柱，全称氨丙基键合硅胶色谱柱，色谱柱家族中最灵活的色谱柱，不仅可以用于正反相还可以应用于离子交换（弱阴离子交换柱）中。

　　氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团更容易水解，特别是当你的使用条件是反相条件下时，要特别注意控制pH值范围，pH值越低越有发生水解的危险；

　　流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险（建议水比例不超过40%）。

　　提示：在使用后以及准备长时间放置该柱时，必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。

　　氨基柱的活化

　　对于新氨基柱，首先应详细阅读使用说明书，了解柱子出厂保存溶剂。一般出厂会保存在正相溶剂中，如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不互溶，请先用异丙醇过渡。过渡过程中应注意异丙醇粘度较大，会导致柱压很高，应使用小流速过渡。

　　当使用反相模式时，用前请使用异丙醇小流速过夜平衡色谱柱。流速建议0.1-0.2mL/min,之后再转换到100%乙腈冲洗20柱体积，然后转换到和流动相相同比例的不含盐的乙腈水体系冲洗20柱体积。

　　当使用正相模式时，如与出厂保存溶剂互溶，可使用流动相直接冲洗20倍柱体积；如不互溶请用异丙醇过渡。

　　氨基柱的冲洗及保存

　　简单来说，正相条件下使用的氨基柱参照硅胶柱的清洗方法；反相条件下使用的氨基柱参照C18的清洗方法。

　　正相使用时，将柱子冲洗干净后，用正己烷-乙腈(99：1)保存（即出厂模式）。

　　反相使用时，如短期不用，可用甲醇或乙腈保存；长期不用时需用异丙醇置换然后保存在正相模式下（即出厂模式）。