艾滋病几种检测方法的研讨

艾滋病即获得性免疫缺陷综合症，由感染“HIV”病毒引起。HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒，它可以侵袭人的免疫体系，并终极损坏人体的免疫功效。随着人体免疫力的下降，人会越来越频繁地感染上各种致病微生物，而且感染的水平也会变得越来越来重，终极会因各种复合感染而导致逝死亡。艾滋病严重威胁人类的身心健康，当我们出现一些异样的症状后，应该选择什么样的检测方法，怎样确诊自己是否患有艾滋病就显得格外重要。按规定的检测程序对艾滋病的检测方法研讨如下。
        1材料和方法
        1.1材料：选取我院临床初筛检测病例72例，其中男性40例，女性32例。年龄28-63岁，平均39岁。
        1.2临床症状：初期的开始症状像伤风、流感、全身疲劳无力、食欲减退、发热、体重减少、随着病情的加重，症状日见增多，如皮肤、粘肤出现白色念球菌感染，单纯疱疹、带状疱疹、紫斑、血肿、血疱、滞血斑、皮肤容易损伤，伤后出血不止等。
        1.3方法：目前作为诊断手段使用的检测主要包括抗HIV病毒抗体检测、核酸检测和抗原检测。其中对病毒抗体的检测是艾滋病初筛实验室常规使用的方法
        1.3.1酶联免疫吸附试验（ELISA）：目前应用的ELISA法有8种之多。它们的特异性和敏感性超过99%。在一些特殊情况下，当抗体检测无法满足HIV感染诊断的需要时，病毒分离及测定、核酸检测、抗原检测可作为辅助手段使用，这包括对非典型血清学反应样品的诊断、HIV感染的窗口期诊断、新生儿早期诊断和对特殊样品的诊断。
        1.3.2明胶颗粒凝集法（PA）：它是快速、简便的一种筛选方法。PA的基本过程是先将样品稀释，然后分别加入经抗原致敏的和未致敏的明胶颗粒，混匀后保温(一般为室温)。当血清中有HIV抗体存在时，经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原抗体反应，根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果。PA操作简便,无需特殊仪器设备,适合对少量标本的检测。是对大量人群初筛实验使用的方法，例公民义务献血的初筛检测。
        1.3.3免疫荧光试验(IFA)：基本原理为应用Ｈ9或HUT78培养细胞作为载体，用HIV感染细胞,该细胞内就会含有HIV抗原,将HIV感染的淋巴细胞涂于玻片上固定，制备为抗原片，加入待检血清，待检血清中的抗 HIV抗体与抗原结合后，再与荧光素标记的抗人Ig结合，在荧光显微镜下可见到细胞内有黄绿色荧光。
        1.3.4免疫印迹试验：主要用于确认试验，基本原理是HIV全病毒抗原经过SDSPAGE电泳，将分子量大小不等的蛋白带分离开来，然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上。将此膜切割成条状，每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。将待检血清样品用稀释液稀释成1/100，再把它直接加到硝酸纤维素膜上，恒温震荡，使其充分接触反应,血清中若含有抗HIV抗体，就会与膜条上的抗原带相结合并呈现紫褐色。此确认实验室是初筛阳性的标本送检省疾控的HIV确认实验室或市疾控的HIV中心实验室进行的。

 1.3.5病毒核酸检测：是通过检测HIV RNA水平来反映病毒载量，具有很高的灵敏度，使用适时荧光聚合酶链反应(PCR)技术，能够在HIV感染的前2周检测到病毒核酸。病毒核酸检测方法可用于HIV的早期诊断，如窗口期辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效测定、预测疾病进程等。目前常用的测定方法有逆转录PCR实验(RT PCR)、核酸序列扩增实验(NASBA)、分支DNA杂交实验(bDNA)等。使用高灵敏度的适时荧光PCR技术，能够在HIV感染的前2周检测到病毒核酸。此种检测是在HIV感染确诊之后，判定使用抗病毒药物的检测指标，现在可有省疾控中心的艾滋病检测实验室完成。
        2结果
        经过我院的检测和分析后，14例送检经确认实验，未确诊艾滋病感染。
        3讨论
        近年来，HIV检测技术取得了很大进展，但是仍有不足的地方。例如ELISA法第四代试剂增加了P24抗原的检测， p24抗原检测能够在病毒开始复制后检测到血液中的可溶性p24抗原，但易出现假阳性。因此，阳性结果必须经中和试验确认，该结果才可作为HIV感染的辅助诊断依据。还有病毒核酸检测方法具有很高的灵敏度，对疾病进展的监测、抗病毒疗效观察和耐药性监测非常重要。但是，由于HIV基因的多样性，没有一套引物可以覆盖所有的HIV序列，使检测的敏感性又受到限制。
        HIV感染的诊断是艾滋病预防控制工作的重要组成部分，建立敏感实用的检测方法对于监测、诊断或血液筛查，控制艾滋病的流行显得尤为重要。总结以上讨论的检测方法，我们得出的结论是，既要提高检测的敏感性、特异性，缩短窗口期，又要简便、快速和降低成本已成为HIV检测技术发展的要求和方向，很多的研究正致力于寻找病毒检测的替代技术。
参考文献
[1]曹韵贞         我国艾滋病的现状         中国抗感染化疗杂志 2002,2(2):65 66
[2]沈霞          艾滋病的实验室诊断        中华检验医学杂志 2003,26（5）：327 328