花粉管的生长及其向化性实验

实验方法原理：成熟的花粉落到柱头上就会萌发，长出花粉管，人为地给以适当条件（温度、pH、介质渗透压）也能使花粉萌发。花粉萌发和花粉管的生长需要一定的营养（包括有机物质和无机物质）。各个花粉粒之间有密切的相互关系，当花粉密度大时，萌发较快，生长也较好，这就是所谓"集体效应"；同时，雌蕊组织能影响花粉管的生长方向，即所谓花粉管的向化性，这对受精过程有重要意义。

实验步骤：

一、材料和设备

1. 植物材料：龙头花（Antirrhinu M   M ajus）。早晨采摘带刚开放花的花序，插入盛有水的容器中。

2. 设备：显微镜；恒温箱；毛笔；镊子；刀片；煤气灯；玻璃小杯；盖玻片；载玻片；4cm 培养皿；9cm 培养皿；8  ml 烧杯；50  ml 烧杯；吸量管；滴管。

3. 试剂：4%琼脂；40%蔗糖溶液；0.04%H3BO4溶液；4%酵母提取物溶液

二、实验步骤

1. 花粉的培养

（1）在直径5 M  M ，高5 M  M 玻璃小杯口上涂上凡士林或羊毛脂，使固定于一干燥的载玻片上，环内放2滴水。共做4个这样的装置。

（2）于8  ml 的小2烧杯中配制培养基1（见表7－1），用滴管将1滴培养基滴于一干净的载玻片上，冷却后，用毛笔将少许龙头花的花粉撒于培养基上，然后将盖玻片带有花粉的一面反盖在上面的小环内。

（3）于另一个8  ml 的烧杯中配制培养基2，其操作同步骤2。

（4）于另一个8  ml 的烧杯中配缺点培养基4，其操作同。

（5）用50  ml 烧杯配制培养基3，取1滴于盖玻片上，操作同上。

（6）把剩余的培养基3分别倒于二个4cm 培养皿中。将其中一个培养皿放入盛有冷水的9cm 培养皿中（水不可溢入小培养皿中），使其底部培养基先冷却，凝固，上层培养基仍处于溶胶状态。将已准备好的龙头花柱头及其他雌蕊组织小心地埋于溶胶中，待溶胶冷却后撒上少许花粉。在另一培养皿中不均匀地撒上洗少许龙头花的花粉。

将以上（2，3，4，5，6）花粉培养物置25℃恒温箱中。

2. 营养条件的观察：10 M in后，将各小环中培养物取出，显微镜下观察比较花粉萌发情况。

3. 集体效应的观察：1h后，取花粉不均匀分布的培养皿，比较花粉密处和稀处的花粉萌发情况。

4. 向化性的观察：1h后，取出埋有雌蕊组织的培养皿，观察雌蕊组织周围花粉管生长情况。

三、结果

1．选择不同营养条件下有代表性的花粉萌发视野观察结果并绘图，比较萌发情况。

2．分别选取培养皿中花粉密处和稀处各3个视野计算花粉萌发的百分率。

3．观察并绘出埋有雌蕊组织的培养皿中龙头花的花粉管生长向化性图。