荚膜染色实验——干墨水法

褐球固氮菌／胶质芽孢杆菌（约 2d 无氮培养基琼脂斜面培养物）

绘图墨水1％ 甲基紫水溶液1％ 结晶紫水溶液6％ 葡萄糖水溶液20％ 硫酸铜水溶液甲醇

载玻片盖玻片滤纸显微镜

1. 制混合液

加一滴 6％ 葡萄糖液于洁净载玻片的一端，然后挑取少量菌体与其混合，再加一环墨水，充分混匀。

2. 涂片

另取一端边缘光滑的载玻片作推片，将推片一端的边缘置于混合液前方，然后稍向后拉，当推片与混合液接触后，轻轻左右移动，使之沿推片接触的后缘散开，尔后以大约 30° 角迅速将混合液推向玻片另一端，使混合液铺成薄层（图 IV-4）。

3. 干燥

空气中自然干燥。

4. 固定

用甲醇浸没涂片固定一分钟，倾去甲醇。

5. 干燥

在酒精灯上方用文火干燥。

6. 染色

用甲基紫染 1～2 min。

7. 水洗

用自来水轻轻冲洗，自然干燥。

8. 镜检

用低倍和高倍镜观察。

背景灰色，菌体紫色，菌体周围的清晰透明圈为荚膜。

玻片必须洁净无油渍，否则，涂片时混合液不能均匀散开。