荧光分光光度计测量物质的注意事项

荧光分光光度计测量物质的注意事项

荧光分光光度计在测量物质时，有以下注意事项。样品应盛在四面透光的石英比色皿（荧光池）中，如果是挥发性样品应使用带塞的荧光池。在荧光分析时，为了得到稳定可靠的数据，一般需要开机预热氙灯大约 30min。如果仪器光源采用的是闪烁氙灯，预热时间可以缩短到 10min 左右。对某些易感光、易分解的荧光物质，尽量采用长波长、低人射光强度及短时间光照。温度变化可引起荧光强度的改变。通常降低温度，有利于提高荧光量子产率，荧光强度增大。温度影响荧光强度的显著程度因样品而异，大部分荧光物质的荧光强度受温度影响不大，测试温度变化不超过 ±3℃，对测试结果几乎无影响。当荧光物质是弱酸或弱碱时，溶液的 pH 对荧光强度有较大影响。因为弱酸或弱碱在不同酸度中，分子和离子的电离平衡会发生改变，而荧光物质的荧光强度会因其离解状态发生改变。荧光物质分子与溶液中其它物质分子之间作用导致荧光强度降低，常见的荧光猝灭剂，如卤素离子、重金属离子、02、硝基化物质、重氮化合物等。溶液中的溶解氧也能引起几乎所有的荧光物质产生不同程度的荧光熄灭现象，因此，在较严格的荧光实验中必须除 02。请注意爱护液体比色皿，特别是测试有机样品的同学请在测量完毕后用有机溶剂清洗，干燥后再放入盒子中，否则会造成比色皿表面严重污染，影响透光度。固体样品池仅剩一个，测试完毕请物归原处。测试完毕请注意登记，关闭仪器。使用荧光光度计检测荧光信号时，比色皿使用完毕要用有机溶剂清洗干净，防止比色皿污染导致测量值不准确，此外实验结束后，要将清洗好的比色皿干燥后再保存。