药物对离体豚鼠冠脉流量的影响
I. 目的
a) 掌握离体心脏灌流实验的方法
b) 观察药物对离体豚鼠心脏冠脉流量的影响
c) 学习自身对照t检验的统计方法
II. 原理
i. 离体心脏实验最常用的方法：
a) 八木氏法
b) Straub法
c) Langendorff法
前两种方法适用于观察药物对两牺类动物青蛙、蟾蜍、等离体心脏，主要观察药物直接对心脏收缩力、传导与心输出量的影响。Langendorff法适用于研究药物对哺乳类动物兔、豚鼠、大白鼠和猫等离体心脏的影响，观察药物对心肌的直接作用，还可以观察药物对冠脉流量的影响。
ii. 离体实验条件：供氧、供能、恒温、恒压
iii. 冠脉循环的解剖特点：心肌的血液供应来自左右冠状动脉。冠状动脉的两个开口在主动脉根部动脉瓣上方，分别叫做左前窦、右后窦。左右冠状动脉及其分支的走向可有多种变异。左冠状动脉主要供应左心室的前部，右冠状动脉主要供应左心室的后部和右心室。左冠状动脉的血液流经毛细血管和静脉后，主要经由冠脉窦回流入右心房，而右冠状动脉的血液则主要经较细的心前静脉直接回流入右心房。另外还有一小部分冠脉血液可通过心最小静脉直接流入左、右心房和心室腔内。
iv. 灌流方法：采用逆血流方向灌注营养液，主动脉瓣关闭，营养液经冠状动脉开口进入心脏冠脉循环，再经由左右心房、心室从上下腔静脉、肺静脉等断口处流出。
v. 与冠脉流量相关因素：
，Q为冠脉流量，P为灌注压，R为冠脉阻力,
为粘滞系数，
为血管长度，r为血管半径。若P恒定，
不变，则Q与r成正比。
III. 材料：
i. 动物：豚鼠；标本：心脏
ii. 器材：恒温装置、供氧系统、恒压装置、主动脉套管、手术器械
iii. 药品：复方丹参注射液
垂体后叶素0.1ug/ml
异丙肾10ug/ml
IV. 方法：
i. 调节仪器：温度37±0.5℃，氧气2-3个/s，压力40-1500px水柱
ii. 制备标本：
a) 击昏豚鼠，剪胸部腹皮，自剑突处剪开胸骨，迅速打开胸腔，暴露心脏，，左手轻轻拿住心脏，剪断上下腔静脉、肺动脉、主动脉及心脏周围的组织，摘出心脏。
b) 用手指轻轻挤压心脏，使心室内残血排出
c) 去除心包膜，找到主动脉。
d) 修剪连接在心脏上的肺叶、气管等累赘物
e) 将主动脉挂在主动脉套管上，供给离体条件。
iii. 稳定标本
连续测定每分冠脉流量，连续三次测定结果相差不大于0.5ml为稳定。一般需5-10min.
iv. 给药：从侧枝沿营养液流向注射药物，快速推注，测定连续10min的每分冠脉流量，取极值计算。
a) 复方丹参注射液0.2ml
b) 垂体后叶素0.1ml
c) 异丙肾0.1ml
V. 结果处理
1.流量增减百分率＝
2.汇集全班数据进行自身对照t检验
配对设计主要有以下情形：
a) 两同质受试对象分别接受两种不同的处理
b) 同一受试对象分别接受两种不同处理
c) 同一受试对象（一种）处理前后
检验步骤：
a) 无效假设：假设给药前后冠脉流量无变化
b) 计算t值
c) 确定P值
自由度n＝n-1
查附录１的表１查t(n)0.05 ,t(n)0.01
若t＞t(n)0.05 或t(n)0.01，P＜0.05或0.01反之亦然。
