菌种的保藏一般选用哪种办法？

菌种的保藏一般选用哪种办法?液氮罐厂家表示液氮超低温保藏法是现在保存微生物菌种*牢靠的办法，多数*级菌种保藏单位都采用此法。

1、准备安培管 用于液氮保藏的安培管，要求能耐受温度忽然改变而不致决裂，因而，需求采用硼硅酸盐玻璃制造的安培管。安培管的大小通常使用75×10mm的安培瓶。

2、加保护剂与灭菌 保存细菌、酵母菌或霉菌孢子等容易涣散的细胞时，则将空安培管塞上棉塞，在压力0.11MPa，温度121℃条件下灭菌15min;若保存霉菌菌丝体则需在安培管内预先参加保护剂，如10%的甘油蒸馏水溶液或10%二甲亚砜蒸馏水溶液，参加量以能浸没今后参加的菌种块为限，而后再进行高压灭菌。


3、接入菌种 将菌种用10%的甘油蒸馏水溶液制成菌悬液，装入已灭菌的安培管;霉菌菌丝体则可用灭菌打孔器，从平板内切取菌落圆块，放入含有保护剂的安培管内，然后用火焰熔封。浸入水中检查有无缝隙。

4、冻住 再将已封口的安培管以每分钟下降1℃的慢速冻住至-30℃。若细胞急剧冷冻，则在细胞内会构成冰的结晶，因而下降存活率。

5、保藏 经冻住至-30℃ 的安培管当即放入液氮冷冻保藏器的小圆筒内，然后再将小圆筒放入液氮保藏器内。液氮保藏器内的气相为-150℃，液态氮为-196℃。

6、恢复培养 保藏的菌种需求用时，将安培管取出，当即放入38～40℃的水浴中进行急剧冻结，直到全部融化为止。再打开安培管，将内容物移到适宜的培养基上培养。