菌种保藏实验_滤纸保藏法

微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。

选用优良菌株，根据生理生化特征隔绝空气使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。

细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏，前两者可保藏2年左右，有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便，不需要特殊设备。

细菌酵母菌放线菌霉菌

肉膏蛋白胨斜面培养基灭菌水灭菌脱脂牛乳五氧化二磷

滤纸安瓿管棉塞灭菌锅培养皿试管镊子干燥器温箱酒精灯冰箱真空泵真空压力表

一、将滤纸剪成0.5×1.2 cm的小条，装入0.6×8 cm的安瓿管中，每管1-2张，塞以棉塞，1.05 kg/cm²，121.3℃灭菌30分钟。

二、将需要保存的菌种，在适宜的斜面培养基上培养，使充分生长。

三、取灭菌脱脂牛乳1-2 ml滴加在灭菌培养皿或试管内，取数环菌苔在牛乳内混匀，制成浓悬液。

四、用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内，使其吸饱，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。

五、将安瓿管放入内有五氧化二磷作吸水剂的干燥器中，用真空泵抽气至干。

六、将棉花塞入管内，用火焰熔封，保存于低温下。

七、需要使用菌种，复活培养时，可将安瓿管口在火焰上烧热，滴一滴冷水在烧热的部位，使玻璃破裂，再用镊子敲掉口端的玻璃，待安瓿管开启后，取出滤纸，放入液体培养基内，置温箱中培养。