葡萄组织培养育苗

一、葡萄嫩梢采集与消毒

将大树或扦插苗长出5—7片叶的嫩梢，取5—10厘米长，去掉幼叶。用自来水冲洗3—5分钟，在70％酒精中浸泡30—40秒钟，用蒸馏水冲洗2—3次，再放入0.5％氯化汞溶液中消毒7一10分钟，最后用无菌水冲洗5—6次后备用。

二、培养基制作与筛选

(一)茎尖培养 方1 1／2ms培养基+6—苄基嘌呤(6—ba)0.5一lppm个荼乙酸(naa)0.01ppm+水解乳蛋白(lh)100ppm+蔗糖2％+琼脂0.6％配制，氢离子浓度调到1585纳摩／升[ph5.8)。在98.06千帕的压力下，高压灭菌20分钟，冷凉待用。山东酿酒葡萄研究所用此方对白羽、红香蕉、白友谊、雷司令等品种茎尖培养成活率达83.5％以上。

方2 1／2ms培养基+赤霉素(ga)0.1ppm+吲哚乙酸(1ba)0.59pm+6-节基嘻吟lppm+激动素(kt)0.5ppm+硫酸腺嘌呤(ade)4ppm+琼脂0.6％+蔗糖0.2％的培养基，对康拜尔芽变(康太)成活较好(辽宁省农科院植保所)。

(二)茎叶分化培养 方1 1／2ms培养基+赤霉素1ppm+吲哚丁酸0.5ppm+6-节基膘吟1ppm+蔗糖2％+琼脂0.6％，氢离子浓度调到1000纳摩／升(ph6.0)。在98.06千帕高压下灭菌20分钟后备用。辽宁省农业科学院植保所对贝达、红富土、黑奥林、巨峰品种族种成活率达90％以上。

方2 用b5大量元素培养基+ms培养基其他元素+吲哚乙酸(1aa)0.01—0.1ppm+6-苄基嘌呤0.02—0.59pm+腺嘌呤(a)2；ppm或水解乳蛋白1000ppm+蔗糖2％—3％+琼脂0.7％，氢离子浓度630.9—1585纳摩／升(ph5.8—6.2)，配好后装入三角瓶中，用两层硫酸纸封口，在98.06—117.67千帕的高压锅中灭菌20分钟，冷凉待用。河南省园艺所用此配方对京早晶品种接种成活效果较好。

(三)幼根分化培养 方1 用bs大量元素培养基+蔗糖4％+吲哚乙酸1ppm+6-苄基嘌呤0.08ppm+琼脂7％，氢离子浓度1000纳摩／升(ph6)，经高压灭菌20分钟，冷凉备用。

辽宁省农业科学院植保所用此配方对红富士、黑奥林、巨峰等品种茎尖培养的单芽段，插入灭菌后的三角瓶培养基中，芽痕高于培养基面3.5毫米，每瓶插入1—3个茎段，插后在黑暗中培养48小时；再转入间歇光照(两支40瓦日光灯下，每天光照10小时)培养，温度保持在23—28℃，20天后幼根平均长分别为99.0，86.3，78.0毫米。