薄层色谱点样选购指南、操作技巧、注意事项（三）

（五）特殊的点样技术

在进行植物成分薄层分离之前，提取是首要的步骤，常用适当溶剂进行待测物质的提取，但此法操作麻烦、样品需要量较大，浓缩提取液时对热不稳定的成分易破坏，因此人们研究了样品不经提取而直接点样的方法。
（长沙德之瑞仪器科技有限公司定量毛细管）

1. 热微量抽出法
   

半个世纪前，人们将一些药物进行微量升华，对升华物进行晶型、熔点以及理化性质等鉴定。在最简单的情况下，只需将几毫克生药粉末放在微量载玻片上加热，升华物被收集到距离放样品载玻片1mm的另一块载玻片上。1968年Stahl将热微量分离转移技术与薄层色谱法连用，称为“热微量抽出法”此法的优点是大大缩短了提取生药中挥发性成分前处理的时间，简化了提取方法，减少了样品用量，缺点是不宜用于非挥发性成分。

将植物粉末样品放在一端拉细的玻璃管中，并同时放入含有一定水分的合适添加剂，使加热过程中保持连续的水蒸气流（在TAS法中除用含水的分子筛作中性发气剂外，还可用酸性发气剂，如丙二酸，在180℃时产生二氧化碳和乙酸，能使样品中的碱性挥发性成分以盐的形式保留而不逸出，而酸性挥发性成分随酸性气体转移到薄层上；反之亦可用碱性发气剂，如含氨的氯化钙，使样品中的碱性成分随氨气转移到薄层上），管的一端用硅橡胶薄膜严密封闭，并放置在一定温度的TAS炉上，装置见图7-3-6。

加热至220℃，挥发性成分气化，并从玻璃管一端的毛细管口逸出，管中同时以30ml/min的氮气流帮助挥发性成分逸出，逸出的气化成分点加到离出口处1mm的薄层上，待上样完毕，按常规方法展开，即可获得热馏分色谱图。

Stahl和Lott发展了此法，设计了可以一定速度横向移动的薄层板装置，可使受热后挥发性成分或热分解产物附着在移动的薄层板起始线上，加热方式可以恒温或程序升温，从而可以得到各种样品的特征谱，改进后的方法称为热分级色谱法。图7-3-7为用市售的“TASOMAT”装置得到的特征图谱。

这种微量快速的上样方法，对天然化合物及合成高分子化合物的分离和鉴定已成为一个重要的手段。下村等在中药厚扑鉴别的研究中应用了此法，只需少量样品即可鉴别厚扑酚（honokiol）；桥本庸平等用此法分离了麻黄碱的旋光异构体，管内残渣经生物碱检查呈阴性，证明加热后麻黄碱的挥发是完全的。Jolliffe等将含有某些生物碱的药物，如乌头、槟榔、颠茄、金鸡纳、麦角、曼陀罗、麻黄、天仙子、罂粟、萝芙木、番木鳖等31种植物药进行热微量抽出法，逸出的挥发性成分直接点在薄层上，用五种不同展开剂展开，用罗丹明B及奶油黄为参比物，显色后对所分离的生物碱进行鉴定。Cheml等将金鸡纳树皮中的生物碱在炉温300℃时挥发至硅胶板上，展开后鉴定辛可宁等七种生物碱。Van Meer等成功地用本法分离了缬草根中的缬草素及异缬草素。Liptak等用本法检验洋茴香、洋甘菊和欧薄荷以及它们的精油类成分。