发布时间:2022-10-03 20:22 原文链接: 蛋白质分析法/免疫法检测金属硫蛋白的介绍

  此类方法主要是通过蛋白质含量测定来计算MT浓度,免疫法是最主要的方法。它尤其适合于微量检测,具有灵敏、特异的特点,灵敏度在pg/ml级,对存在体液中含量甚微的MT具有较好的检测效果。在近些年,先后建立了Western Blotting法、放射性免疫检测法(RIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)。

  RIA法首先由Mallie等在1979年检测大鼠血清中MT的含量时建立的,随后Mulder等建立了测定人体液中MT含量的RIA,Zahir Shaidh A等报道了用RIA检测镉污染地区人群的尿液MT含量。此方法的检测范围在0.1~100ng/ml之间,但是此方法要用放射性同位素,需要3天左右的时间,给检测带来不便。

  1986年Thomas等建立了ELISA法,与RIA法无显著差异,灵敏度可达100pg/ml,与RIA相比具有测定相对迅速,且不需昂贵的仪器设备和接触放射性同位素。Akintola等在1995年利用MT-1制备抗体建立了ELISA测定人血浆和尿液中的MT含量,检测限可达5ng/ml。郑军恒等在检测人血液中的MT过程中建立了2种ELISA方法,直接型ELISA的检测范围为1~10ng,可用于检测较纯样品,竞争性ELISA较好的检测范围是50~500ng,用于检测较粗的样品中MT的含量。