血栓与止血的质量控制

     在血栓与止血检验的全过程中，实验结果会受到诸多因素的影响。质量控制是保证实验结果准确的重要措施。当实验出现意想不到的结果时，应从各方面寻找原因，最后找到问题所在，通过改进措施，得到一个准确的结果。
一、受检状态的影响：
    受检者的状态，如被测者生理变化、饮食改变、环境因素、服用药物等引起变化，在采集血标本时若未注意到这些因素也会对结果做出错误判断。
    不同的药物和某些生理状况（如怀孕、情绪激动、剧烈运动）会对一些凝血结果造成影响。阿斯匹林、潘生丁和抵克利德等药物能抑制血小板聚集，肝素和口服抗凝剂能抑制凝血机能。尿激酶（UK）和链激酶（SK）等可进促纤溶功能。口服避孕药会使血小板粘附功能、血小板聚集功能、纤维蛋白原、凝血酶原以及凝血因子Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅻ 因子活性明显升高。剧烈运动和月经期纤溶活性明显升高，高脂肪食物造成血脂升高可抑制纤溶活性。吸烟可使血小板聚集性明显升高。饮酒可抑制血小板聚集性。剧烈运动或输注肾上腺素时，Ⅷ因子活性会快速上升。
    因此，当出现一些意想不到的结果时，应考虑是否有以上因素的影响。
二、标本的采集：
1.确认病人的姓名，采血管上应注明病人的姓名，同检验申请单核对，避免张冠李带。
2.受检者必须在休息状态下，并且在早餐前采血，对于观察疗效和预防临床出血病人的监测最好在同一条件下采血。
3.采集血液必须用塑料或硅化的玻璃注射器，避免凝血因子激活，最好使用双筒注射器采血，禁用血气用的注射器。
4.针头必须采用21号（外径0.8mm）以上，儿童可用23号。
5.止血带不应扎得过紧，最好不要超过5分钟。
6.采血人员应技术熟练，“一针见血”，以防组织损伤，由于外源性凝血因子进入针管，会使凝血因子激活，可造成PT和APTT时间缩短。取血时，拉针的速度要慢并且均匀，使血液平稳地进入注射器，防止气泡产生。泡沫的产生可使纤维蛋白原，因子V和因子Ⅶ变性。
7.迅速将血液与抗凝剂轻轻的颠倒混匀，避免用力振荡而破坏凝血蛋白。
8.采集后的血液应放在加塞子的试管内，因为未加塞子的试管会使血液中的CO2丢失，PH升高，使PT和APTT时间延长。
9.分离血浆时用塑料吸头移取，并盛放在塑料管内。因玻璃表面能激活凝血过程，从而使凝血时间缩短。
    总之，实验人员采血最好，因为他们知道采血的注意事项，也能尽量缩短采血后至实验前标本放置的时间。
三、标本的制备：
1.采血之后血液在室温放置时间不能超过2小时。
2.全血贮存在4-10℃不超过2小时，最好在1小时内分离血浆，-20℃可保存2周，-80℃可保存18个月，冷冻血浆中的凝血因子在越低温度下越稳定。
3.如果检测冷冻血浆，必须在37℃水浴中快速溶解，冷冻过的血浆不能再次冷冻。冷冻血浆融化时，不能在室温中让其自然融化，这样会使纤维蛋白原析出和凝血因子消耗。
4.溶血标本可造成PT和APTT轻微缩短。
5.血浆制备，血样应在2000-2500g离心10-15分钟。
四、抗凝剂
1.标本应采集在含有枸橼酸钠（109mmol/L）抗凝剂的试管内，抗凝剂与血的比例应为1：9，混匀要充分。
2.应准确把握抗凝剂的浓度。即Na3C6H5O7. 2H2O为3.2％, Na3C6H5O7. 5H2O为3.8％。
3.当Hct>0.55或Hct<0.25时，务必用MacGann推荐的公式计算抗凝剂的用量，抗凝剂的用量（ml）＝0.00185×全血量（ml）×〔1-Hct（%）〕，否则结果不可信，Hct低可使PT和APTT凝固时间缩短，Hct高可使PT和APTT凝固时间延长。
4.如果自配抗凝剂，枸橼酸钠应为基准试剂或分析纯试剂。
5.抗凝剂＋抗聚剂：通常选用CTAD液，成份：枸橼酸钠0.11mol/L，茶碱15mmol/L，腺苷3.7mmol/L，潘生丁0.198mmo1/L。优点：采血后血小板很少活化，且保存时间可超过15小时。
6.抗凝剂＋抗纤溶剂：在溶栓治疗的实验室监测中，若用常用抗凝剂会使纤溶系统持续激活，可使纤维蛋白原及其降解产物（FDP）的定量比现差异。应该使用“抗凝剂十抗纤溶剂”的抗凝剂，抗纤溶剂可选用抑肽酶，它可以抑制激肽释放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶、凝血因子和纤溶活性，能精确测定纤维蛋白原，但会引起凝血酶时间的延长。
五、试剂
1.蒸馏水：使用重蒸水比用去离子水好，蒸馏水的PH为6.0-7.0。水质不能有混浊，应无菌，无Ca2+、无致热源。
2.有保护剂、抗生素、抗体或其它添加剂的水不能用于溶剂试剂。
3.复溶后的试剂，不用时应加盖子，储存在2-8℃，APTT和FIB均不要冷冻保存。冬天运输时，注意防冻。
4.稀释倍数要准确，并标明复溶或开瓶时间。复溶后在冰箱中贮存时间不能过长，国产试剂最长7天，复溶试剂需用几天的，不应在预温槽中放置时间过长，最好取出部分试剂，剩余即放回冰箱内冷藏。
5.试剂与质控品均应在有效期内使用。
6.溶解试剂时不能剧烈振摇，防止产生气溶胶。

六、操作
1.检查所有试剂和缓冲液是否有沉淀、污染等问题，发现异常情况应及时更换。
2.更换不同厂家或同一厂家不同批号的试剂时，使用之前必须重新进行定标，这一点必须切记！
3.检查孵育或温度设置是否正