血液形态学观察实验

实验步骤                                                         1. 染色：瑞特氏（Wright’s）法

刺破耳垂或指尖，取血一滴，置玻片上，用另一玻片以30度角将血液推成厚薄均匀之涂片。干燥后，用瑞特氏染液数滴加于涂片上，再加蒸馏水，然后水洗至粉红色，干后即可观察。瑞氏染液用美蓝和伊红混合配制而成，其中部分美蓝氧化成为天青。染色后，对碱性染料美蓝有亲和力的部位呈蓝色；对酸性染料伊红有亲和力者呈鲜红色；对天青有亲和力者呈紫红色；对酸性染科和碱性染科都没有较强亲和力者则着色轻微，呈淡红色或淡紫色。

2. 肉眼观察：

标准的血涂片呈一很薄的“血膜”，一端平直（后端），另一端呈圆弧形（前端），故整体呈舌形。由于血涂片封片后易于退色，故一般未加盖玻片。注意仔细观察辨认血涂片的正反面，将有血膜面朝上置于低倍镜下观察。

3. 低倍镜观察：

大部分是红色无核的红细胞，其中散布少量白细胞，核染成蓝色。选择细胞分布均匀且白细胞较多的部位，涂片一般后半部较好。

4. 高倍镜观察：

通过微调节器确认低倍镜下看到的细胞（以白细胞为佳），以保证血涂片的血膜面朝

上。

5. 油镜观察

辨认红细胞、各种白细胞及血小板。注意参看教材所附的彩图。

（1） 红细胞：圆形，无核，呈红色，中央着色较边缘浅（何故?）

（2）中性粒细胞：圆形，比红细胞大，胞质呈淡红色，内含淡紫红色的细小颗粒，分布均匀。核分叶，2~5叶不等，大多为2~3叶。叶间有染色质丝相连，染成蓝色，也有不分叶的杆状核。

（3）嗜酸性粒细胞：数量较少，较中性粒细胞大，胞质呈淡红色，内含大量粗大的桔红色颗粒，分布均匀而密集。核多为2叶，染成蓝色。

（4）嗜碱性粒细胞：数量极少，很难找到。胞质内含大小不等的蓝色颗粒，分布不均，常遮盖核。核分叶、S形或不规则形，着色浅。

（5）淋巴细胞：大小不一，以小淋巴细胞居多，其直径似红细胞。核呈圆形，占细胞的大部，一侧稍有凹陷。染色质致密呈块状，染成深蓝色。胞质少，呈一窄带围绕核，染成蔚蓝色，有时含少量紫红色的嗜天青颗粒。大的淋巴细胞胞质较多，核染色浅。

（6）单核细胞：体积最大，数量较少。核呈肾形与马蹄铁形，染色质颗粒细而松散，故染色较浅；胞质较多，染成灰蓝色，内含较多细小的嗜天青颗粒。

（7）血小板：体积最小，直径约为红细胞的1/3，成群分布在血细胞之间，呈不规则形，胞质染成浅蓝色，中央含紫色的颗粒。

白细胞分类计数：在熟悉各种血细胞形态的基础上，用高倍镜或油镜进行白细胞分类计数。为了避免重复计数，可按图5所示的顺序推移玻片，观察50~100白细胞，分别记录其种类，并将结果核算成百分数。