血液DNA提取试剂盒血液DNAout

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中文名称：血液DNA提取试剂盒

英文名称：血液DNAout

产品编号：3671

产品类别：分子生物学

生产厂家：国产

产品价格：90元

产品规格：10 次(简装)

产品介绍：

本产品用于提取新鲜或冷冻的动物(包括禽类)及人抗凝全血基因组DNA。

性能指标：

1.DNA纯净,OD260/280在1.8-2.0之间。不含蛋白质和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、杂交等。DNA产量为30-50 ml/mL全血。

2.操作简单,整个过程约15分钟,室温操作,适合大规模样品处理。血液处理量可达1 mL,不需要柱子,不会发生其他同类产品经常发生的堵塞现象。

3.价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格只有其一半左右。

4.安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。

使用方法：

将20-200 mg克剪碎的组织或0.1-1 ml血液直接加到0.75 ml溶液A中短暂匀浆，65℃保温5分钟后15000 g离心1分钟，上清尤氲忍寤芤?SPAN lang=EN-US>B混匀, 冰浴2分钟,15000 g离心1分钟，上清加入等体积的氯仿(自备)混匀后15000 g离心5分钟,最后用等体积异丙醇沉淀上清得到DNA沉淀，用1 ml 75%乙醇(自备)清洗2次后将沉淀溶于缓冲液中待用。

实验数据：

图一:血液DNAOUT效果图

图注：用本产品提取1 ml兔全血(左图)和0.1 ml抗凝鸡全血(抗凝剂:血液=1:1)得到的DNA(中图),得到的DNA分别溶于50 ml和250 ml TE后取10 ml上样,在0.8%琼脂糖凝胶和1 X SuperBuffer中300 V电泳10分钟后直接在UV灯下照相。M为全长l 嗜菌体DNA。按国内某试剂盒提取方法提取0.2 ml鸡血,柱子在离心后被堵, 实验失败(右图)。

表一: 血液DNAOUT与国内某试剂盒提取血液DNA数据比较

260/280产率

兔全血1.61(3)16.58(3)

鸡全血1.82(3)626.8(3)

鸭全血1.83(3)948.71(3)

关联产品：

微量DNA助沉剂DNAdown

非冻型DNA组织保存液:DNALOCKER

超快DNA电泳缓冲液:SuperBuffer

血液DNAOUT 提取试剂盒使用说明

一: 血液DNAOUT 提取试剂盒简介

适用对象 新鲜或冷冻的动物及人抗凝全血基因组DNA的提取。

作用原理 所含去污剂裂解细胞并释放出DNA,所含DNase抑制剂能抑制DNase的活性,所含去蛋白剂能清除血液细胞中所含的蛋白质成份。所含RNase能去除RNA的污染。

试剂盒成份 “溶液A”,“溶液B”和“溶液C”。

性能指标 DNA产量与国内同类产品相当。

使用优点 操作简单 整个过程约15分钟,室温操作,适合大规模样品处理。

DNA纯净 获得的DNA纯度高，可直接用于PCR、酶切、杂交等。

价廉物美 与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜一半左右。

安全无毒 本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

物理特性 2-8℃保存,保存期限为12个月。

自备试剂 氯仿,异丙醇，75%乙醇。

二: 血液DNAOUT的使用

1. 在1ml抗凝全血中加入0.5ml“溶液A”(冷冻血需先37℃水浴融化)，吹打混匀。

2. 室温离心15000rpm，2分钟，沉淀呈红色。小心倾去上清。

3. 再加入1ml“溶液A”，轻柔的吹打混匀，使细胞完全分散。

4. 室温离心15000rpm, 2分钟，沉淀呈粉白色。倾去上清。

5. 加入0.6ml“溶液B”(用前摇匀)，用1ml吸头彻底吹打混匀。

6. 68℃水浴10分钟(此步可省略，但产量略有降低)。

7. 加入0.2ml氯仿和0.3ml“溶液C”，立即小心的颠倒混匀。

8. 室温离心15000rpm,3分钟，小心将上清(约0.7ml)转移至一新的离心管中，加入等体积异丙醇，轻柔的颠倒混匀5-8次，此时出现絮状DNA沉淀。

9. 室温离心15000rpm，1分钟，去尽上清。

10. 加入75%乙醇洗涤沉淀，室温离心15000rpm，1分钟。

11. 重复步骤10。

12. 室温干燥DNA沉淀10分钟，加入TE缓冲液0.1-0.3ml。65℃水浴10分钟溶解DNA，中速振荡5秒混匀。