血清的透析

实验材料 血清HBSS

仪器、耗材 瓶子盖子无菌过滤器透析袋大烧杯本生灯三脚架量筒

实验步骤

1. 将30 mm × 500 mm 的五个透析袋煮沸，换三次蒸馏水。

2. 将透析袋转移到 Hanks’s 的平衡盐溶液中（HBSS）（HBSS 储存于4°C），冷却。

3. 在每个透析袋的一端打两个结。

4. 每个透析袋装一半的血清（需要透析的血清）（20 ml )。

5. 压入空气后将透析袋的另一端也打上结，在血清和结之间留出大约一半管子的空间。

6. 将透析袋放入 5 L 的HBSS 中，放到磁力搅拌器上搅拌，4°C 过夜。

7. 更换 HBSS，重复步骤6 两次。

8. 将血清收集到量筒中，并记录收集的量（如果少于开始时血清的量 , 则加人 HBSS 使其恢复到开始的量 。如果多于开始时血清的量，则随后加入培养基时要留出预留量 )。

9. 用一系列过滤器（无菌过滤器，0.1 μm 孔径；预过滤器：孔径大小为 5.0 μm 的玻璃纤维，1.2 μm、0.45 μm 和0.22 μm 的滤膜（如 Durapore，Millipore））对血清进行灭菌。

10. 将血清装瓶冷冻。