补体结合反应实验

实验材料 伤寒的抽出液

试剂、试剂盒 豚鼠血清兔血清绵羊红血球

仪器、耗材 小试管试管架水浴锅

实验步骤

一、预备试验

预备试验包括溶血素效价的滴定，补体效价的滴定，抗原效价的滴定及被检血清的处理。

1.  溶血素效价的滴定：按照下表加入各物

凡最高稀释度的溶血素可呈现完全溶血者为一个单位。依上表结果第10管（即1：4000倍稀释）0.5毫升溶血素为一个单位，在溶血反应中常用0.5毫升中含有2个溶血素单位的溶液，所以试验时应取1：2000倍稀释的溶液。

2.  补体单位滴定：依下表加入各试剂

能引起完全溶血的最小补体量称为准确单位，上表中第3管（即0.3毫升），但因补体的效价可能有部分损失，故普通稍高的一管为实用单位，实际试验时须用两个实用单位。

上表的结果为：

补体标准单位：0.3毫升

补体实用单位：0.35毫升

补体两个实用单位：0.70毫升

因试验时是两个实用单位的补体0.5毫升，可依下列比例关系换算：

20：0.7=ⅹ：0.5

ⅹ= 14.3

即须将补体稀释14.3倍，用0.5毫升则含有两个实用单位。

3.  抗原的滴定

在用已知抗原测定未知抗体时，必须先滴定抗原效价以决定本试验时所需抗原的最适浓度（反之用已知抗体测定未知抗原时，则需滴定抗体效价） 

如血清对照管呈完全或部分不溶血是为抗补体现象。血清严重污染细菌，混有淋巴液或显著溶血时，常产生很强抗外体作用。又如试管、吸管不清洁，也可出现抗补体。若有抗补体发生，应抽血重试验。