讲述细胞培养实验室无菌操作环境的构建

1、细胞培养箱之细胞培养实验室，必须要在无菌的环境下操作，无菌操作室 无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域，能与外界隔离，不能穿行或受其他干扰。 

   理想的无菌操作室应划为三部分：
a） 更衣室—―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
  b） 缓冲间—―位于更衣间与操作间之间，目的是为了保证操作间的无菌环境，同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。
c） 无菌操作间—―于无菌操作、细胞培养。其大小要适当，且其顶部不宜过高（不超过2.5m）以保证紫外线的有效灭菌效果;墙壁光滑无死角以便清洁和消毒。

    工作台安置不应靠墙壁，台面要光滑压塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。
 细胞培养箱--无菌操作间的空气消毒：紫外线灯;-产生臭氧，并且室内温度及湿度均较高，不利于工作人员健康。
    空气过滤的恒温恒湿装置。
  洁净室（区）空气洁净度级别表洁净度级别：
尘粒允许数/立方米 100级 3,500 0 5 110000级;
  微生物允许数 350,000 2,000 100 3100000级
  浮游菌/立方米 3,500,000 20,000 50010300000级
  沉降菌/皿 10,350,000 60,000 - 15
  无臭氧紫外线消毒器电子消毒灭菌器;
    在高压电场作用下，电子管的内外电极发生强烈电子轰击，使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。臭氧是一种强氧化剂，能同细菌的胞膜及酶蛋白氢硫基进行氧化分解反应，从而靠臭氧气体弥漫性扩散达到杀菌之目的，消毒时没有死角。消毒后空间的残留臭氧只需30～40min即能自行还原成氧气，空气不留异味，消毒物体表面不留残毒。

   2、净化工作台 操作简单，安装方便，占用空间小且净化效果很好。 
一般细菌培养室使用的净化工作台主要有两种：
a）侧流式或称垂直式
b）外流式或称水平层流式。
  净化工作台工作原理大致相同，通常是将室内空气经粗过滤器初滤，由离心风机压入静压箱，再经空气过滤器精滤，由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区，从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。

     侧流式工作台：空气净化后的气流由左或右侧通过工作台面流向对侧，也有从上向下或从下向上流向对侧，形成气流屏障保持工作区无菌。工作台结构为封闭式。
    
     外流式（水平式）工作台：净化后的空气面向操作者流动，因而外方气流不致混入操作，但进行有害物质实验操作则对操作者不利。