化学发光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay,CLIA)是一种高灵敏度的免疫分析技术,它将免疫反应的特异性与化学发光检测的高灵敏度相结合,用于定量或定性检测生物样本中的各种抗原、抗体和其他生物分子。


基本原理:


CLIA 主要基于免疫反应和化学发光反应。首先,将待测样本中的目标分析物(抗原或抗体)与特异性的抗体或抗原进行免疫反应,形成免疫复合物。然后,通过一系列化学反应,使免疫复合物中的标记物产生化学发光信号。


标记物:


常用的化学发光标记物有吖啶酯、鲁米诺及其衍生物、异鲁米诺等。这些标记物在特定的化学条件下能够被激发产生光信号。


检测过程:


  1. 抗原或抗体的标记:将待测的抗原或抗体与化学发光标记物进行偶联,使其具有发光特性。

  2. 免疫反应:将标记后的抗原或抗体与样本中的对应抗体或抗原发生特异性结合,形成免疫复合物。

  3. 分离和洗涤:去除未结合的物质,以减少背景干扰。

  4. 化学发光反应:加入触发剂,引发标记物产生化学发光。

  5. 检测和定量:使用化学发光检测仪测量发光强度,发光强度与待测物的浓度成正比,从而实现定量分析。


优点:


  1. 高灵敏度:能够检测到极低浓度的生物分子,检测下限通常可达 pg/mL 甚至 fg/mL 级别。

  2. 宽线性范围:可以在较宽的浓度范围内保持良好的线性关系,有利于准确测定不同浓度水平的分析物。

  3. 快速:检测速度相对较快,能够在较短时间内获得结果。

  4. 自动化:易于实现自动化操作,减少人为误差,提高检测的重复性和准确性。


应用:


CLIA 在临床诊断中广泛应用于以下方面:


  1. 激素检测:如甲状腺激素、性激素、胰岛素等。

  2. 肿瘤标志物检测:例如甲胎蛋白、癌胚抗原等。

  3. 传染病检测:如乙肝、丙肝、艾滋病等病毒标志物的检测。

  4. 心血管疾病标志物检测:心肌肌钙蛋白、脑钠肽等。


总之,化学发光免疫分析作为一种先进的检测技术,在临床医学、生物学研究和药物研发等领域发挥着重要作用。


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