谷氨酰胺转胺酶的分离纯化及酶学性质

摘　要: 茂原链轮丝菌S t reptoverticillium mobaraense 所产生的谷氨酰胺转胺酶发酵液通过抽滤、超滤、乙醇沉淀、离心和冷冻干燥,制得粗酶粉的酶活约为1 033 U/ g. 对粗酶研究发现,该酶的最适反应温度为52 ℃,最适pH 为6. 0 ;粗酶的pH 稳定范围在4～8 ,温度稳定范围在20～40 ℃,离子强度对该酶的活性稍有影响. 粗酶经CM2纤维素层析和Sephadex G275 凝胶过滤层析后得到较纯的酶,通过SDS2聚丙烯酰胺凝胶电泳检验蛋白质纯度,得到较弱的单一区带. 其中,CM2纤维素层析的纯化倍数为4. 5 ,收率质量分数约为78. 8 %;凝胶过滤层析纯化倍数为1. 11 ,收率质量分数为50 %;用凝胶过滤法测得谷氨酰胺转胺酶的相对分子质量为40 092。