质谱在蛋白质组学中的应用实验

实验材料 冷冻干燥样品

试剂、试剂盒 校准标准品基质溶液甲醇

仪器、耗材 MALDI 质谱仪MALDI 板

实验步骤

1.吸取 0.5ul 的基质溶液，加到 MALDI-MS 分析所用的金属样品板上的样品孔中（为了准确起见，请使用2ul 的移液器）。

2.在基质干燥之前，迅速加入 0.5ul 的标准品或样品到基质中。

3.置于室温条件或 40℃ 的烘箱内约 5 min，让溶剂蒸发以使样品干燥。

4.把金属板转移到质谱仪的真空舱内。

5.以恰好高于离子化阈值的激光能量来「预热」校准标准品，从而获得初始质量图谱。

6.然后，降低激光能量直到获得高质量的图谱。

7.用适合的校准物来获得线性的两点（two—point) 外标校准（参考表 8.9 和表 8.10)

8.对未知样品重复步骤 5 和步骤 6, 并与校准值相比较以获得精确的质量。

9.使用完毕后，用水彻底冲洗 MALDI 板以除去任何可见的晶体，然后再用无棉绒薄纸（例如，Kimwipes 纸）沾甲醇擦拭。